Allegato A Area scientifico-disciplinare: 06. PROGRAMMA DI RICERCA Un assegno per la durata di 4 anni. Titolo della ricerca: differenze correlate all'eta' nella produzione di citochine: implicazioni per la terapia dello shock settico. Descrizione: la ricerca in oggetto si propone di chiarire il ruolo delle citochine nella patogenesi dello shock settico neonatale, nella prospettiva di un potenziale impiego terapeutico di tali sostanze o dei loro antagonisti. Partendo dai dati di precedenti studi, che hanno evidenziato in un modello murino di shock settico neonatale una marcata produzione di TNF- <$>alpha, - <$> ed una ridotta produzione di IFN- <$>gamma <$>, l'obiettivo principale della ricerca e' quello di studiare i meccanismi alla base dell'ipoproduzione di quest'ultima citochina. Si valutera', in particolare, l'ipotesi che la diminuita produzione di IFN- <$>gamma <$> sia secondaria ad una ipoproduzione di IL-12 o ad una ridotta responsivita' delle cellule T e NK e/o al TNF- <$>alpha- <$> oppure, infine, ad una eccessiva produzione di IL-10. Quest'ultima ipotesi risulta plausibile se si considera che nostri recenti dati hanno dimostrato nel neonato una spiccata tendenza a produrre alti quantitativi di IL-10 in seguito a stimolazione con diversi batteri uccisi sia gram <$>,+ <$> che gram <$>,- <$> e loro componenti purificati. Un secondo obiettivo e' chiarire i meccanismi che sono alla base dell'aumentata produzione di IL-10 con particolare riguardo al ruolo potenziale di questa citochina nel favorire la diffusione delle infezioni da patogeni intracellulari come Listeria. Oltre a cio' verranno indagati i componenti batterici e i meccanismi molecolari responsabili dell'induzione di citochine in monociti umani. Settore scientifico-disciplinare: F05X. Sede: Istituto di microbiologia, facolta' di medicina e chirurgia, policlinico universitario di Messina. Titolo di studio richiesto: laurea in scienze biologiche. Argomenti del colloquio: a) citochine pro-infiammatorie ed anti-infiammatorie; b) saggi immunoenzimatici; c) reazione a catena della polimerasi; d) estrazione e quantificazione di acidi nucleici; e) preparazione di anticorpi monoclonali; f) culture cellulari; g) produzione di anticorpi ricombinanti; h) metodi per la determinazione di sequenze di acidi nucleici; i) librerie di DNA genomico e di cDNA; l) trasformazione di ceppi batterici; m) tecniche di purificazione di antigeni batterici. ----------------------------------------