ALLEGATO IV
LINEE DIRETTRICI PER LA VALUTAZIONE DEGLI ADDITIVI
NELL'ALIMENTAZIONE DEGLI ANIMALI
CONSIDERAZIONI GENERALI
Le presenti linee direttrici rappresentanto una guida per la
costituzione dei fascicoli concernenti le sostanze potenzialmente
ammissibili come additivi negli alimenti per animali. Tali fascicoli
devono permettere di valutare gli additivi in base alle conoscenze
del momento e di accertare che essi rispondano ai principi
fondamentali cui e' subordinata la loro ammissione, a norma
dell'articolo 9 del presente regolamento relativo agli additivi
nell'alimentazione degli animali.
Tutti gli studi indicati in questo documento concernente le linee
direttrici e, se del caso, anche informazioni supplementari potranno
essere richiesti.
In linea di massima, dovranno esere forniti i risultati degli
studi intesi a stabilire l'identita', le condizioni di impiego, le
proprieta' fisico-chimiche, i metodi di controllo e l'efficacia
dell'additivo nonche' il suo metabolismo e i suoi effetti biologici e
tossicologici sulle specie bersaglio. Gli studi necesssari alla
valutazione dei rischi per la salute umana e per l'ambiente
dipenderanno essenzialmente dalla natura dell'additivo e dalle
circostanze del suo impiego. Sotto questo profilo, non prevarra'
alcuna regola rigorosa.
Non sarebbe sempre giustificato sottoporre gli additivi destinati
esclusivamente agli alimenti per animali domestici ad un complesso di
prove sulla tossicita' cronica, sulle proprieta' mutageniche e
cancerogene quanto quelle imposte per gli additivi destinati
all'alimentazione degli animali da reddito, i cui prodotti vengono
consumati dall'uomo.
Per determinare la tossicita' cronica sono generalmente
sufficienti studi della durata di un anno effettuati su due specie
bersaglio oppure su una specie bersaglio e il ratto. In genere si
puo' fare a meno di procedere a studi sulle proprieta' mutageniche e
cancerogene quando non vi sia alcuna indicazione di mutazioni in base
alla composizione chimica alle esperienze nell'utilizzazione o altro.
Si puo' rinunciare a determinare i residui nel caso degli animali
familiari.
E' di fondamentale importanza conoscere il metabolismo
dell'additivo nell'organismo degli animali da reddito nonche' i
residui e la relativa biodisponibilita'. Questa conoscenza deve
consentire di stabilire in special modo la portata degli studi
tossicologici da effettuare sugli animali da laboratorio al fine di
valutare gli eventuali rischi per il consumatore. Questa valutazione
non potra' in alcun caso basarsi su dati limitati all'azione diretta
dell'additivo sull'animale da laboratorio. Questi non permetterebbero
di ottenere alcuna informazione specifica sugli effetti reali dei
residui derivanti dal metabolismo nelle specie alle quali e'
destinato l'additivo.
Qualsiasi richiesta di ammissione di un additivo o di un nuovo
impiego di un additivo dovra' essere accompagnata da un fascicolo nel
quale devono figurare relazioni paticolareggiate, presentate
nell'ordine e secondo la numerazione proposta nelle presenti linee
direttrici. La mancanza nel fascicolo di uno qualsiasi degli esami
previsti dovra' essere motivata. Le pubblicazioni citate a titolo di
riferimento saranno allegate al fascicolo. Le relazioni concernenti
le sperimentazioni devono includere il programma e il numero di
riferimento della sperimentazione, la descrizione particolareggiata
delle prove, i loro risultati ed effetti nonche' il nome l'indirizzo
e la firma del responsabile dello studio. Le relazioni devono essere
corredate di una dichiarazione del responsabile per le buone prassi
di laboratorio relativa all'osservanza di queste ultime.
Per la determinazione delle proprieta' fisico-chimiche,
tossicologiche ed ecotossicologiche dovranno essere utilizzati i
metodi stabiliti dal decreto ministeriale 3 dicembre 1985 e dal
decreto del Presidente della Repubblica 20 febbraio 1988, n. 141
concernente il ravvicinamento delle disposizioni legislative,
regolamentari ed amministrative relative alla classificazione,
all'imballaggio e all'etichettatura delle sostanze pericolose, o
altri metodi internazionalmente riconosciuti negli ambienti
scientifici. L'impiego di altri metodi dovra' essere giustificato.
In ogni fascicolo figurera' un riassunto adeguato. Ai fascicoli
concernenti gli antibiotici, i coccidiostatici e le altre sostanze
medicamentose nonche' a quelli relativi ai fattori di crescita, sara'
inoltre necessario allegare una monografia conforme al modello che
figura nel capitolo V e tale da consentire di identificare e
caratterizzare l'additivo considerato dalla sua composizione, dal suo
grado di purezza nonche' dalle sue proprieta' fisico-chimiche e
biologiche.
Nel presente documento il termine "additivo" si riferisce ai
principi attivi o alle preparazioni contenenti principi attivi, nello
stato in cui questi ultimi saranno incorporati nelle premiscele e
negli alimenti per animali.
Qualsiasi modifica nel procedimento di fabbricazione, nella
composizione di un additivo, nelle condizioni e nei settori d'impiego
del medesimo dovra' essere notificata in tempo debito alla
Commissione dallo Stato membro che le ha presentato il fascicolo.
Potra' inoltre essere richiesta la presentazione di una
documentazione idonea ad una nuova valutazione. Queste condizioni
dovranno essere rispettate in special modo per i prodotti ricavati da
microrganismi di cui sia stato modificato il patrimonio genetico o da
mutanti naturali.
CAPITOLO I
RIEPILOGO DEI DATI DEL FASCICOLO
CAPITOLO II
IDENTITA', CARATTERISTICHE E CONDIZIONI D'IMPIEGO DELL'ADDITIVO
METODI DI CONTROLLO
1. Identita' dell'additivo.
1.1. Denominazioni commerciali previste per la commercializzazione.
1.2. Tipo di additivo in base all'azione principale (ad esempio
antibiotico, coccidiostatico, istomonostatico, conservativo,
ecc.).
1.3. Stato fisico, dimensione delle particelle.
1.4. Composizione qualitativa e quantitativa (principio attivo,
altri componenti, impurita').
1.5. Procedimento di fabbricazione. Eventuali trattamenti
specifici.
2. Specificazioni concernenti il principio attivo.
2.1. Denominazione generica, denominazione chimica secondo la
nomenclatura UICPA, altre denominazioni generiche e
abbreviazioni. Numero CAS (Chemical Abstracts Service Num-
ber).
2.2. Formula grezza e formula di struttura, peso molecolare. Se si
tratta di prodotti di fermentazione, composizione qualitativa
e quantitativa dei principali elementi.
2.3. Grado di purezza. Composizione qualitativa e quantitativa
delle impurita'.
2.4. Proprieta' elettrostatiche, punto di fusione, punto di
ebollizione, temperatura di decomposizione, densita', tensione
di vapore, solubilita' nell'acqua e nei solventi organici,
spettri di massa e di assorbimento e qualsiasi altra
proprieta' fisica pertinente.
2.5. Procedimenti di fabbricazione e di purificazione. Variazioni
della composizione delle partite nel corso della produzione.
NB: Se il principio attivo e' una miscela di componenti
attivi, ciascuno dei componenti principali definibile
chimicamente sara' descritto separatamente. Saranno altresi'
indicate le rispettive percentuali nella miscela.
3. Proprieta' fisico-chimiche e tecnologie dell'additivo.
3.1. Stabilita' rispetto agli agenti atmosferici (luce,
temperatura, umidita', ossigeno, ecc.).
3.2. Stabilita' durante la preparazione delle premiscele e degli
alimenti, in particolare stabilita' nei confronti del calore,
della pressione e dell'umidita'. Eventuali prodotti di
decomposizione.
3.3. Stabilita' durante la conservazione delle premiscele e degli
alimenti (durata di conservazione).
3.4. Altre proprieta' fisico-chimiche e tecnologiche appropriate,
in particolare attitudine all'omogeneizzazione nelle
premiscele e negli alimenti, proprieta' relative alla
formazione di polveri.
3.5. Interazioni fisico-chimiche (incompatibilita' con gli
alimenti, altri additivi o medicamenti, ecc.).
4. Condizioni di impiego dell'additivo.
4.1. Impieghi previsti nel campo dell'alimentazione animale (specie o
categoria animale, categoria dell'alimento per animali,
periodi di utilizzazione e di sospensione della
somministrazione, ecc.).
4.2. Controindicazioni.
4.3. Concentrazioni previste nelle premiscele e negli alimenti
(tenori di principio attivo, in percentuale ponderale per le
premiscele, in mg/kg per gli alimenti).
4.4. Altri impieghi noti del principio attivo o della preparazione
(nelle derrate alimentari, in medicina umana o veterinaria, in
agricoltura, ecc.). Per ogni impiego occorre indicare le
denominazioni commerciali, le indicazioni e le
controindicazioni del prodotto.
4.5. Se necessario, misure di prevenzione dai rischi e mezzi di
protezione nella produzione e nella manipolazione.
5. Metodi di controllo.
5.1. Descrizione dei metodi utilizzati per stabilire i criteri
enunciati nei punti 1.4, 2.3, 2.4, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4 e 4.3.
5.2. Descrizione dei metodi di analisi qualitativa e quantitativa
destinati al controllo ordinario dell'additivo nelle
premiscele e negli alimenti.
5.3. Descrizione dei metodi di analisi qualitativa e quantitativa
destinati all'individuazione dei residui degli obiettivi nei
prodotti di origine animale.
NB: La descrizione di questi metodi sara' accompagnata da
indicazioni sui tassi di recupero, sulla specificita', la
sensibilita', le eventuali interferenze, i limiti di
rilevamento, la riproducibilita' e i metodi di prelievo dei
campioni. Dovranno inoltre essere disponibili campioni di
riferimento del preparato e del principio attivo.
CAPITOLO III
STUDI CONCERNENTI L'EFFICACIA DELL'ADDITIVO
1. Studi concernenti il miglioramento della qualita' degli
alimenti per animali.
Questi studi riguardano gli additivi tecnologici come, ad
esempio, gli antiossidanti, i conservativi, gli emulsionanti,
i gelificanti, ecc., che sono destinati a migliorare la
qualita' delle premiscele e degli alimenti per animali o a
prolungare la durata di conservazione.
Sara' opportuno sottolineare gli effetti ricercati con l'uso
dell'additivo mediante criteri appositi, confrontando gli
alimenti integrati nelle condizioni di impiego previste con
alimenti di riferimento e, se necessario, con alimenti
contenenti additivi tecnologici la cui efficacia e' nota.
Per ogni studio occorrera' indicare la natura esatta del
principio attivo, delle preparazioni, delle premiscele e degli
alimenti esaminati, il numero di riferimento delle partite, la
concentrazione di principio attivo nelle premiscele e negli
alimenti, le condizioni delle prove (temperatura, umidita',
ecc.), le date e la durata delle prove nonche' gli effetti
sfavorevoli e altri inconvenienti riscontrati nel corso delle
prove.
2. Studi concernenti gli effetti sui prodotti animali.
Questi studi riguardano gli additivi zootecnici, cioe' gli
antibiotici, i fattori di crescita, i coccidiostatici e altre
sostanza medicamentose, ecc., che hanno effetti diretti sui
prodotti animali. Gli studi indicati qui di seguito verranno
effettuati su ciascuna specie bersaglio facendo un raffronto
con gruppi di animali di riferimento e, se del caso, con
gruppi di animali che ricevono alimenti contenenti additivi la
cui efficacia e' nota.
2.1. Per gli antibiotici e i fattori di crescita, studio degli
effetti dell'additivo sull'efficacia alimentare, sulla
crescita degli animali e sulla resa delle produzioni animali.
Determinazione dei raporti dosi/effetti.
2.2. Per i coccidiostatici e le altre sostanze medicamentose
bisognerebbe dare importanza in primo luogo all'accertamento
degli effetti specifici, soprattutto il potere profilattico
(per esempio morbilita', numero delle oocisti, valutazioni
delle lesioni, ecc.). Dovrebbero essere fornite congiuntamente
informazioni concernenti gli effetti sull'assimilazione
dell'alimento, sulla crescita degli animali, nonche' sulla
quantita' e qualita' commerciale dei prodotti di origine
animale.
2.3. Condizioni sperimentali.
Descrivere dettagliatamente e singolarmente le prove
effettuate. Il verbale dovra' consentire di effettuare
un'analisi statistica dei risultati. E' necessario fornire
indicazioni precise riguardanti:
2.3.1. La specie, la razza, l'eta' e il sesso degli animali nonche'
il modo di identificazione dei medesimi.
2.3.2. Il numero di gruppi sotto prova e di riferimento; il numero di
animali di ciascun gruppo. Per entrambi i sessi dovra' essere
scelto un numero sufficiente di cavie per scopi statistici.
2.3.3. La concentrazione dell'additivo negli alimenti ottenuta
mediante un'analisi di controllo. Il numero di riferimento
della partita utilizzata. Sul piano della tecnica
dell'alimentazione la composizione qualitativa e quantitativa
della razione giornaliera.
2.3.4. Il luogo delle prove, lo stato fisiologico e sanitario degli
animali e le diverse tecniche e condizioni di alimentazione e
di allevamento secondo le pratiche in uso nella Comunita'.
2.3.5. Le date e la durata esatta delle prove, le date degli esami
effettuati.
2.3.6. Gli effetti sfavorevoli e altri inconvenienti manifestatisi
nel corso delle prove ed il momento della loro comparsa.
3. Controlli della qualita' dei prodotti di origine animale.
Esame delle proprieta' organolettiche, fisiologico-alimentari,
igieniche e tecnologiche di prodotti commestibili di animali
ai quali e' stato somministrato mangime arricchito con
l'additivo.
CAPITOLO IV
STUDI CONCERNENTI LA SICUREZZA DELL'IMPIEGO DELL'ADDITIVO
Gli studi elencati in questo capitolo sono destinati a valutare:
- la sicurezza dell'impiego dell'additivo per le specie bersaglio,
- i rischi per il consumatore che possono derivare dal consumo di
prodotti alimentari contenenti residui dell'additivo,
- i rischi dovuti all'inalazione e al contatto cutaneo per le
persone che devono manipolare l'additivo in quanto tale o incorporato
nelle premiscele o negli alimenti,
- i rischi di contaminazione dell'ambiente ad opera di prodotti
provenienti dall'additivo, escreti dagli animali.
Questi studi saranno obbligatori in tutto o in parte in funzione
della natura dell'additivo e delle condizioni d'impiego proposte. La
conoscenza del metabolismo del principio attivo nelle varie specie
bersaglio nonche' della composizione e della biodisponibilita' dei
residui tessutali del medesimo sara' di fondamentale importanza per
definire la portata degli studi sugli animali da laboratorio che sono
necessari per valutare i rischi per il consumatore.
Peraltro, la conoscenza della composizione e delle proprieta' fisico-
chimiche e biologiche dei prodotti escreti provenienti dall'additivo
sara' indispensabile per stabilire i limiti degli studi destinati a
valutare i rischi di contaminazione dell'ambiente.
1. Studi sulle specie bersaglio.
1.1. Studi tossicologici dell'additivo:
Prove di tolleranza. Studio degli effetti biologici,
tossicologici, macroscopici e istologici. Determinazione del
coefficiente di sicurezza (margine fra la dose massima
proposta e al dose che provoca effetti negativi). Qualora sia
dimostrato che la dose che provoca effetti negativi supera
ampiamente la dose massima proposta, del coefficiente si
protra' indicare un valore minimo o approssimativo.
1.2. Studi microbiologici dell'additivo.
1.2.1. Studio del campo d'azione microbiologico dell'additivo tramite
accertamento della concentrazione minima di resistenza in spe-
cie batteriche patogene e non patogene gram-negative e gram-
positive.
1.2.2. Studio della resistenza incrociata ad antibiotici terapeutici
tramite accertamento della concentrazione minima di resistenza
in mutanti prodotti in vitro aventi una resistenza cromosomica
al principio attivo.
1.2.3. Studi volti ad accertare se l'additivo e' in grado di
selezionare fattori di resistenza. Questi studi vanno svolti
in condizioni naturali sulle specie animali cui l'additivo e'
in primo luogo destinato. Va inoltre accertato se i fattori di
resistenze eventualmente rilevati hanno una resistenza
multipla e se sono trasferibili.
1.2.4. Studi volti a rilevare l'effetto dell'additivo sulla normale
flora intestinale e sulla colonizzazione del tubo digerente e
l'escrezione di microrganismi patogeni.
1.2.5. Indagini sul campo volte ad accertare la percentuale di
batteri resistenti all'additivo. Questi studi vanno svolti
prima e durante la somministrazione dell'additivo, ad
intervalli abbastanza distanziati (controllo).
1.3. Studio del metabolismo e dei residui del principio attivo (1)
(2).
1.3.1. Studio del bilancio metabolico: tasso di escrezione urinaria,
fecale e, se del caso, respiratoria del principio attivo;
tassi residui nell'organismo.
1.3.2. Studio del metabolismo: assorbimento, distribuzione,
biotrasformazione, eliminazione. Se del caso, dati relativi
all'escrezione biliare, all'esistenza di un ciclo
enteropatico, all'influenza della cecotrofia.
1.3.3. Studio analitico dei residui: composizione qualitativa e
quantitativa dei residui (principio attivo, metaboliti) nei
vari organi e tessuti dell'animale nonche' dei prodotti
commestibili provenienti dall'animale, dopo la prova
dell'equilibrio metabolico e nelle condizioni pratiche di
impiego dell'additivo.
1.3.4. Studio farmocinetico dei residui (dopo ingestione ripetuta
dell'additivo in base alle condizioni d'impiego proposte):
persistere del principio attivo e dei principali metaboliti
nei vari organi e tessuti una volta eliminato l'alimento
contenente l'additivo.
1.3.5. Studio della biodisponibilita' dei residui nei tessuti e nelle
produzioni delle specie bersaglio (vedi punto 3.8.).
1.3.6. Metodi di controllo: descrizione dei metodi di determinazione
qualitativa e quantitativa utilizzati negli studi richiesti ai
punti da 1.3.1. a 1.3.5., con indicazione dei tassi di
recupero, della specificita' e dei limiti di rilevamento. I
metodi di analisi dei residui devono essere sufficientemente
sensibili per consentire di rilevare i residui a livello
tossicologicamente trascurabili.
2. Studio dei residui escreti.
2.1. Natura e concentrazione dei residui derivati dall'additivo
(principio attivo, metaboliti) negli escrementi.
2.2. Persistenza (durata di semi-vita) e cinetica di eliminazione di
questi residui nei liquami, nei letami e nelle lettiere.
2.3. Effetti sulla metanogenesi.
2.4. Degradazione, persistenza (durata di semi-vita) e cinetica di
eliminazione nei suoli (diversi tipi di suoli).
2.5. Effetti sulla fauna del suolo e sui processi microbici di
trasformazione (decomposizione dei residui vegetali e animali,
trasformazioni dell'azoto, ecc.).
2.6. Effetti sui vegetali terrestri (germinazione delle sementi,
crescita delle piante, assorbimento da parte della pianta,
ecc.). Questi studi vanno effettuati in serra e all'aperto su
varie specie vegetali.
2.7. Solubilita' e stabilita' nell'acqua dei prodotti derivati
dall'additivo (principio attivo, metaboliti).
2.8. Effetti sulla vita acquatica.
2.8.1. Effetti sulla flora (ad esempio, Chlorella).
2.8.2. Tossicita' su invertebrati (ad esempio, Daphnia magna).
2.8.3. Tossicita' sui pesci (almeno due specie scelte fra le specie
selvatiche viventi nel territorio della Comunita').
3. Studi su animali da laboratorio.
Questi studi dovranno essere effettuati sul principio attivo e
sui suoi principali metaboliti se questi ultimi sono pure
presenti nei prodotti alimentari di origine animale e se sono
biodisponibili. Nella misura del possibile si dovra' cercare
di scegliere animali da laboratorio che nei confronti
dell'additivo probabilmente presentano analogie metaboliche
con l'uomo.
Occorrera' fornire una descrizione esauriente delle prove effettuate
precisando la specie ed il ceppo degli animali utilizzati, le
dimensioni ed il numero dei gruppi sottoposti alla sperimentazione e
dei gruppi di riferimento, le dosi somministrate, la composizione
quantitativa e qualitativa del regime alimentare e i risultati delle
analisi degli alimenti, le condizioni di allevamento, la durata
esatta delle prove, le date dell'esecuzione delle varie prove e della
mortalita'. Gli eventi macroscopici di tipo patologico ed
istopatologico osservati negli animali sottoposti alle prove e
l'indicazione del momento dell'apparizione di tutte le lesioni
patologiche dovranno essere esposti in relazioni particolareggiate.
Tutti i risutalti devono essere illustrati in modo dettagliato ed
essere accompagnati da una valutazione statistica.
(1) Gli studi di cui ai punti 1.3.1., 1.3.2., 1.3.4., e 1.3.5.
verranno eseguiti utilizzando, preferibilmente, molecole marcate. La
marcatura deve essere adeguata all'obiettivo perseguito.
(2) Per i prodotti di fermentazione, questi studi dovrebbero
riguardare anche le sostanze affini al principio attivo e ottenute
con il procedimento di produzione.
3.1. Tossicita' acuta.
3.1.1. Gli studi sulla tossicita' acuta per via orale dovranno essere
effettuati su almeno due specie animali, una delle quali sara'
preferibilmente il ratto. La dose massima non dovrebbe super-
are 2.000 mg/kg di peso corporeo. Saranno riferiti gli esiti
di osservazioni particolareggiate sugli effetti biologici nel
corso di un periodo di almeno due settimane dopo l'ingestione.
3.1.2. Saranno effettuati studi sulla tossicita' acuta per
inalazione e sul potere irritante nei confronti della cute e,
se necessario, delle mucose, nonche' sul potenziale
allergogeno procedendo a prove adeguate che consentano di
valutare gli eventuali rischi connessi con la manipolazione
dell'additivo.
3.2. Mutagenesi.
Per identificare le sostanze attive o i relativi metaboliti
che hanno proprieta' mutagene, sara' opportuno effettuare una
serie di prove combinate e selettive di mutagenesi basate su
differenti meccanismi genetici. Queste prove dovranno essere
effettuate per l'attivazione metabolica in presenza e in
assenza di un preparato di microsomi di mammiferi.
Si raccomanda di procedere all'insieme delle seguenti prove:
a) prova di mutazione genetica in un sistema procariota,
b) prova di mutazione genetica in un sistema eucariota in
vitro o prova letale recessiva collegata al sesso nella
Drosophila melanogaster,
c) prova concernente i danni cromosomici in vitro e in vivo.
La serie di indagini summenzionata non implica tuttavia che
altre prove, segnatamente prove in vivo, siano inadeguate o
che i risultati di altre ancora non possano essere considerati
come una soluzione alternativa.
Dovranno comunque essere indicati i motivi della scelta di una
determinata prova. Le prove dovranno essere effettuate
conformemente alle procedure comprovate vigenti. In funzione
dei risultati ottenuti e tenuto conto dello spettro di
tossicita' della sostanza nonche' dell'uso che si intende fare
della medesima, potranno essere opportuni ulteriori esami.
3.3. Aspetti metabolici e farmacocinetici.
Occorrera' effettuare studi del bilancio metabolico e
procedere all'identificazione dei metaboliti utilizzando
molecole opportunamente contrassegnate e dopo somministrazione
di dosi singole e multiple del principio attivo per un
adeguato periodo di tempo. Gli studi del metabolismo devono
comprendere quelli sugli aspetti farmacocinetici del principio
attivo e dei principali metaboliti. Per la scelta delle specie
piu' adatta su cui effettuare le ricerche tossicologiche
ulteriori si terra' conto delle differenze nella
metabolizzazione del principio attivo tra le specie.
3.4. Tossicita' a breve termine.
Come regola generale, queste prove verranno effettuate su due
specie animali, una delle quali sara' preferibilmente il
ratto. La seconda specie potra' essere, in taluni casi, una
specie bersaglio. La sostanza sara' somministrata per via
orale e si dovra' inoltre valutare la relazione dose-risposta.
La durata della prova effettuata con roditori dovra' essere di
almeno 90 giorni.
In taluni casi saranno auspicabili studi della durata di 6
mesi - 2 anni sul cane e su altri animali diversi dai
roditori, per stabilire la variazione di sensibilita' di di-
verse specie animali nei confronti della sostanza in causa.
3.5. Tossicita' cronica o a lungo termine/potere concerogeno.
Gli studi sulla tossicita' cronica saranno effettuati su una
specie appartenente all'ordine dei roditori (preferibilmente
il ratto) mentre quelli sul potere cancerogeno saranno
effettuati di preferenza su due specie di roditori. La
sostanza sara' somministrata per via orale a differenti
dosaggi. E' inoltre possibile ricorrere a uno studio associato
sulla tossicita' cronica e sul potere cancerogeno con
esposizione in utero. La durata degli esperimenti sara' di
almeno due anni nel caso del ratto e di almeno 80 settimane
nel caso del topo. Se continuano oltre il termine previsto,
gli esperimenti saranno considerati conclusi quando il numero
di animali sopravvissuti di ciascun gruppo, fatta eccezione
per quello che ha ricevuto la dose piu' elevata, sara' ridotto
al 20%. Esami completi clinico-chimici, ematologici e delle
urine saranno effettuati ad intervalli appropriati nel corso
dell'esperimento. Dovranno inoltre essere effettuati completi
studi macroscopici e istologici su tutti gli animali morti
durante la sperimentazione e su quelli sopravvissuti al
termine della medesima.
3.6. Effetti sulla riproduzione.
Gli studi riguardanti la riproduzione saranno effettuati
preferibilmente sul ratto e si estenderanno su almeno due
generazioni in linea diretta; essi potranno essere associati a
studi di embriotossicita', ivi compresa la teratogenesi.
Particolare attenzione sara' accordata alla gestazione, alla
fecondita', alla fertilita', all'osservazione delle figliate
nel corso della loro evoluzione ed i risultati dovranno essere
registrati. Gli studi specifici sulla teratogenesi saranno
effettuati su almeno due specie adatte, una delle quali sara'
il coniglio.
3.7. Biodisponibilita'.
Per chiarire l'evoluzione dei residui del principio attivo
marcato presenti nei tessuti e nelle produzioni della specie
bersaglio, occorrera' effettuare uno studio di
biodisponibilita' comprendente almeno uno studio del bilancio
dei residui dopo l'ingestione da parte degli animali da
laboratorio.
3.8. Tossicologia dei metabolici.
E' richiesta una documentazione per poter calcolare la
concentrazione di residui quale base per una valutazione dei
rischi per l'uomo.
Devono essere presentati i dati relativi al calcolo dei tempi
di attesa proposti.
3.9. Altri studi appropriati.
Potra' essere presentato qualsiasi altro studio che fornisca
informazioni supplementari utili ai fini della valutazione
della sostanza in questione.
CAPITOLO V
MODELLO DI UNA MONOGRAFIA
1. Identita' dell'additivo.
1.1. Tipo di additivo in base all'azione principale (ad esempio
antibiotico, coccidiostatico, istomonostatico, fattore di
crescita, ecc.).
1.2. Stato fisico, dimensione delle particelle.
1.3. Composizione qualitativa e quantitativa (principio attivo,
altri componenti, impurita').
1.4. Eventuale trattamento specifico.
2. Specificazioni inerenti al principio attivo.
2.1. Denominazione generica, denominazione chimica secondo la
nomenclatura IUPAC, altre definizioni generiche e
abbreviazioni. Numero CAS (Chemical Abstracts Service Num-
ber).
2.2. Formula grezza e formula di struttura, peso molecolare. Per
quanto concerne i prodotti di fermentazione, composizione
qualitativa e quantitativa dei principali elementi.
2.3. Grado di purezza. Composizione qualitativa e quantitativa
delle impurita'.
2.4. Proprieta' fisiche rilevanti, in particolare proprieta'
elettrostatiche, punto di fusione, punto di ebollizione,
temperatura di decomposizione, densita', pressione di vapore,
solubilita' nell'acqua e nei solventi organici, spettro di
assorbimento, ecc.
NB: Se il principio attivo e' una miscela di componenti attivi,
ciascuno dei componenti principali definibile chimicamente sara'
descritto separatamente. Saranno altresi' indicate le rispettive
percentuali nella miscela.
3. Proprieta' fisico-chimiche e tecnologiche dell'additivo.
3.1. Stabilita' rispetto agli agenti atmosferici (luce,
temperatura, umidita', ossigeno, ecc.).
3.2. Stabilita' durante la preparazione delle premiscele e degli
alimenti, in particolare nei confronti del calore, della
pressione e dell'umidita'. Eventuali prodotti di
decomposizione.
3.3. Stabilita' durante la conservazione delle premiscele degli
alimenti (durata di conservazione).
3.4. Altre proprieta' fisico-chimiche e tecnologiche appropriate,
in particolare attitudine all'omogeneizzazione nelle
premiscele e negli alimenti, proprieta' relative alla
formazione di polveri.
3.5. Interazioni fisico-chimiche (incompatibilita' con alimenti,
altri additivi o medicinali, ecc.).
4. Metodi di controllo.
4.1. Descrizione dei metodi utilizzati per stabilire i criteri
enunciati nei punti 1.3., 2.3., 2.4., 3.1., 3.2., 3.3. e 3.4.
del presente capitolo.
4.2. Descrizione dei metodi di analisi qualitativa e quantitativa
destinati all'individuazione dei residui degli additivi nei
prodotti di origine animale.
4.3. Se i metodi sopraddetti sono pubblicati e' sufficiente
indicare i riferimenti alla letteratura.
5. Proprieta' biologiche dell'additivo.
5.1. Per i coccidiostatici e altri medicinali, indicazione degli
effetti profilattici (morbilita', numero delle oocisti, ecc.). 5.2.
Per gli antibiotici e i fattori di crescita, indicazione degli
effetti sull'assimilazione degli alimenti, sulla crescita
degli animali e sulla qualita' dei prodotti di origine
animale.
5.3. Eventuali controindicazioni o avvertenze, comprese le
incompatibilita' biologiche con l'indicazione delle relative
giustificazioni.
6. Indicazione della qualita' e della quantita' dei residui
eventuali nei prodotti di origine animale nelle condizioni
dell'impiego previsto.
7. Altre caratteristiche rilevanti per l'identificazione
dell'additivo.