LVII - DETERMINAZIONE DEL RAPPORTO 13C/12C RELATIVO ALL'ALCOL DA
FERMENTAZIONE DI MOSTI, MC, MCR E DA VINI TRAMITE
SPETTROMETRO DI MASSA PER LA DETERMINAZIONE DI RAPPORTI DI
ISOTOPI STABILI (SIRA - IRMS).
Principio del metodo.
La determinazione del contenuto sitospecifico del deuterio
nell'alcol etilico secondo la metodica prevista dal regolamento CEE
n. 2676/90, al fine della rivelazione di un eventuale aumento del
titolo alcolometrico naturale dei mosti di uve, dei mosti di uve
concentrati, dei mosti di uve concentrati rettificati e dei vini,
trova dei limiti di utilizzo nel caso di impiego sofisticato di
miscele di zuccheri o alcoli provenienti da piante a ciclo C3 (ciclo
di Calvin) e da piante a ciclo C4 (ciclo di Hatch - Slack),
esemplificate nel primo caso dalla bietola oltre che dalla vite, e
nel secondo caso della canna da zucchero e dal mais, che tendono a
ricreare i parametri isotopici del deuterio tipici dell'uva.
Lo stesso regolamento CEE sopra citato, prevede un completamento
dell'accertamento analitico 2H-NMR con quello del rapporto isotopico
13C/12C sull'alcol.
L'utilita' di tale determinazione e' legata al fatto che le due
diverse vie di fissazione fotosintetica della CO2 per la biosintesi
degli zuccheri portano ad un diverso valore del rapporto isotopico
13C/12C con intervalli di variabilita' nettamente distinti fra le due
categorie di piante sopra citate.
Apparecchiatura.
Spettrometro di massa del tipo SIRA II (VG) capace di determinare
il valore di 13C all'abbondanza naturale, con una precisione di
0,05(Per Mille), o migliore, usando un ciclo di misura con 10 periodi
di integrazione o piu'.
Apparato per la combustione, che converta quantitativamente tutto
il carbonio del campione in CO2 e per la purificazione della CO2
dagli altri prodotti di combustione volatili, del tipo Analizzatore
Elementare Carlo Erba NA 1500.
Bilancia analitica con precisione di 0,1 mg, o migliore, per la
pesata del campione.
Dispositivo che assicuri l'introduzione del campione liquido nel
dispositivo di combustione senza evaporazione dello stesso.
Preparazione del campione.
Alcol distillato secondo le indicazioni della metodica di cui al
punto 8 del regolamento CEE 2676/90.
Combustione del campione (all'incirca tra 1-5 mg) con conversione
quantitativa del carbonio in CO2, onde evitare frazionamenti
isotopici. La CO2 cosi' ottenuta viene purificata da altri componenti
gassosi tramite utilizzo ad es. di trappole criogeniche.
Misura del rapporto 13C/12C.
La misura di tale rapporto viene effettuata sulla CO2 ottenuta
come sopra descritto tramite spettrometro di massa per la misura di
rapporti di isotopi stabili. Tale spettrometro puo' essere a doppio o
triplo collettore per la misura dei fasci ionici di massa 44, 45, 46.
Lo spettrometro e' equipaggiato con doppio sistema di accesso alla
camera di ionizzazione, che permette di misurare alternativamente il
campione in analisi e uno standard di riferimento, ottenendo cosi'
una maggiore accuratezza nel determinare variazioni del contenuto
isotopico.
La combustione dell'alcol, la purificazione della CO2 e la
determinazione del rapporto 13C/12C sono effettuati in doppio per
ogni campione, con ciclo di 10 o piu' integrazioni, con un errore
analitico di 0,2(Per Mille), o meno.
Espressione dei risultati.
Il rapporto 13C/12C e' determinato per comparazione tra i raggi
ionici derivanti da 13C 16 O2 (massa 45) e 12C 16 O2 (massa 44), dopo
aver applicato alle differenze misurate le correzioni dovute ai
possibili fattori strumentali e al contributo di 12C 16O 17O al
segnale di massa 45 (Craig correction).
Il rapporto isotopico 13C/12C viene espresso in "delta per mille"
((Per Mille)). Il valore 13C e' la differenza espressa in per mille
tra il rapporto 13C/12C del campione e quello dello standard
internazionale PDB (Pee Dee Belemnite). Per la determinazione
analitica si utilizzano standards internazionali calibrati con la
PDB.
L'espressione in 13C(Per Mille) risulta essere:
(13C/12C)c - (13C/12C)r
13C(Per Mille) = _______________________ . 1000
(13C/12C)r
dove:
c = campione
r = riferimento
XLII - RADIOCARBONIO
La tabella I - Valori medi di radioattivita' da 14C nell'etanolo
di vini di sicura annata, viene completata con i seguenti dati:
=====================================================================
Annata dpm/g di C
_____________________________________________________________________
1982 16,33
1983 16,10
1984 15,85
1985 15,65
1986 15,40
1987 15,18
1988 14,98
1989 14,72
1990 14,54
Il Ministro dell'agricoltura e delle foreste
FONTANA