ALLEGATO II
Metodo per la determinazione del mercaptobenzotiazolo e del suo sale
di zinco e del disolfuro di benzotiazile.
1) SCOPO E CAMPO DI APPLICAZIONE
Il metodo consente di determinare il mercaptobenzotiazolo (MBT), il
suo sale di zinco e il disolfuro di benzotiazile (previa loro
trasformazione a MBT) nel liquido di cessione.
2) PRINCIPIO DEL METODO
La determinazione viene effettuata mediante preparazione del liquido
di cessione del campione.
3) REATTIVI
Tutti i solventi devono essere di purezza analitica ed idonei per
HPLC.
3.1 Cloruro di Metilene
3.2 Solfato di Sodio Anidro
3.3 Acetone
3.4 Soluzione di Cloruro Stannoso al 5% in Acido Cloridrico
concentrato
3.5 Acetonitrile
3.6 Acqua
3.7 Mercaptobenzotiazolo
3.8 Fase mobile: A) Acetonitrile (3.5)
B) Acqua (3.6): Acetonitrile (3.5) 99:1
3.9 Soluzione concentrata di MBT (3.7) 200 mg/l: pesare accuratamente
circa 10 mg di MBT (3.7) (precisione +- 0,1 mg) e portare a volume
con acetonitrile (3.5) in matraccio da 50 ml.
3.10 Soluzione intermedia di MBT (3.7) 40 mg/l: prelevare 5 ml della
soluzione concentrata (3.9) e diluirli a 25 ml in matraccio tarato
con acetonitrile (3.5).
3.11 Soluzioni di calibrazione: preparare con opportune diluizioni 5
soluzioni nell'intervallo di concentrazione compreso tra 0,25 mg/l e
4 mg/l. Se nel liquido di cessione il MBT (3.7) e' presente in
quantita' pari al limite massimo consentito di 0,05 mg/l, dopo aver
portato l'estratto al volume finale di 10 ml, la soluzione ottenuta
avra' una concentrazione finale di 1 mg/l, che rientra
nell'intervallo prescelto per la preparazione delle soluzioni di
calibrazione.
4) APPARECCHIATURA
4.1 Materiale comune da laboratorio.
4.2 Vetreria comune da laboratorio.
4.3 Evaporatore rotante.
4.4 Cromatografo liquido con sistema gradiente dotato di rivelatore
spettrofotometrico ultravioletto, regolato alla lunghezza d'onda di
320 mm.
4.5 Colonna impaccata con ottadecilsilsilice (lunghezza 200 mm;
diametro interno 2,1 mm; dp 5mym)
5) PROCEDIMENTO
5.1 Preparazione del campione
Circa 10 grammi del campione di gomma in esame sono sottoposti a
lavaggio per 10 minuti in un becker contenente circa 300 ml di acqua
(3.6) in ebollizione. Il campione e' lasciato raffreddare a
temperatura ambiente ed accuratamente asciugato.
5.2 Preparazione del liquido di cessione
Il campione tagliato in una decina di parti da un grammo ciascuna,
pesato accuratamente (precisione +- 0,1 mg), e' posto in una beuta
contenente 200 ml di acqua (3.6) poi posta in termostato a 40 gradi
centigradi per 24 ore. Scaduto il tempo di contatto, 100 ml del
liquido di cessione vengono trasferiti in un pallone a fondo tondo.
5.3 Riduzione, estrazione e concentrazione
100 ml di liquido di cessione vengono portati a secco in evaporatore
rotante (4.3) sottovuoto alla temperatura di 50 gradi centigradi.
Il residuo viene ripreso con 30 ml di acetone (3.3) e trattato con 10
ml di una soluzione di cloruro stannoso al 5% in acido cloridrico
concentrato (3.4).
La soluzione viene lasciata a riposo per circa 10 minuti. Quindi si
concentra in evaporatore rotante sotto vuoto a circa 10 ml; questi,
trasferiti in imbuto separatore, vengono sottoposti a tre estrazioni
con cloruro di metilene (3.1), usando porzioni di 15 ml ciascuna. Le
tre frazioni di cloruro di metilene vengono riunite e seccate su
solfato di sodio anidro (3.2), evaporate a secchezza e trasferite
quantitativamente in matraccio tarato da 10 ml con acetonitrile
(3.5). La soluzione campione cosi' ottenuta e' pronta per essere
analizzata.
5.4 Analisi cromatografica
5.4.1 Condizioni Operative
PROGRAMMA DI GRADIENTE
TEMPO %A %B
0 20 80
1 20 80
20 70 30
30 20 80
36 20 80
Flusso: 0,8 ml/min
Iniettare le soluzioni di calibrazione (3.11) 3 volte ciascuna.
Iniettare almeno 3 volte la soluzione campione (5.3).
Nell'eventualita' che il quantitativo di MBT (3.7) nel campione in
esame sia cosi' elevato da non rientrare nell'intervallo di
concentrazione delle soluzioni di calibrazione sara' necessario
diluire opportunamente l'estratto (5.3).
5.4.2 Identificazione
L'identificazione del picco dell'MBT (3.7) e' realizzata mediante
confronto del tempo di ritenzione con il tempo di ritenzione delle
soluzioni di riferimento (3.11).
5.4.3 Determinazione
La determinazione quantitativa e' realizzata con il metodo dello
standard esterno, mediante integrazione dell'area del picco a calcolo
dell'altezza del picco, facendo riferimento ai corrispondenti valori
delle aree e delle altezze dei picchi delle soluzioni di riferimento.
6) ESPRESSIONE DEI RISULTATI
6.1 Calcolo
Per calcolare la concentrazione di MBT nel liquido di cessione si
applica la seguente formula:
Cm mg/l = 0,05 x Ce mg/l
dove
Cm = concentrazione dell'MBT nel liquido di cessione;
Ce = concentrazione dell'MBT nell'estratto calcolato tramite la retta
di calibrazione.
Le quantita' di MBT, del suo sale di zinco e del disolfuro di
benzotiazile vengono calcolate globalmente come MBT.
Ai fini dell'idoneita' del campione in esame, tale quantita' non deve
essere superiore a 0,05 mg/l riferito alla soluzione della prova di
cessione.