METODO 21
DETERMINAZIONE DEL FOSFORO TOTALE
1. Oggetto e campo di applicazione
Descrizione di un metodo per la determinazione del fosforo totale.
Il metodo e' applicabile a tutti i tipi di suolo.
2. Principio
Il metodo prevede la mineralizzazione del campione con acido
solforico e acqua ossigenata e il dosaggio del fosforo per via
colorimetrica al blu fosfomolibdico.
3. Reagenti
Nel corso dell'analisi utilizzare acqua distillata o di purezza
equivalente e reagenti di qualita' analitica riconosciuta.
3.1. Acido solforico, H2SO4, al 96% (rho = 1,84).
3.2. Idrogeno perossido, H2O2, soluzione 400 ml/l (v/v).
3.3. Acido solforico, H2SO4, soluzione 5 mol/l: a 400 ml circa di
acqua, contenuti in un matraccio da 1000 ml, aggiungere lentamente e
sotto continua agitazione, 278 ml di H2SO4 (3.1). Raffreddare e
completare a volume.
3.4. Reagente solfomolibdico: a 400 ml circa di acqua, contenuti in
un matraccio da 1000 ml, aggiungere lentamente e sotto continua
agitazione, 278 ml di H2SO4 (3.3). Raffreddare a circa 50 C, quindi
49,08 g di ammonio p-molibdato, (NH4)6Mo7O24 per 4H2O, e agitare fino
a dissoluzione. Raffreddare e portare a volume con acqua.
3.5. Acido ascorbico, C6H8O6.
3.6. Potassio antimoniltartrato, K(SbO)C4H4O6 per 1/2H2O, soluzione
0,5 g/l: sciogliere 0,5 g di K(SbO)C4H4O6 per 1/2H2O in 1000 ml di
acqua.
3.7 Reagente colorimetrico: a 500 ml circa di acqua, contenuti in un
matraccio da 1000 ml, addizionare nell'ordine:
- 1,7 g di acido ascorbico (3.5);
- 17 ml di reagente solfomolibdico (3.4);
- 25 ml di acido solforico 5 mol/l (3.3);
- 85 ml di postassio antimoniltartrato soluzione (3.6).
Completare a volume con acqua. La soluzione deve essere preparata al
momento dell'uso.
3.8. Sodio idrossido, NaOH, soluzione 1 mol/l: sciogliere 40 g di
sodio idrossido in un litro di acqua.
3.9. Fenoftaleina, C20H14O4, soluzione etanolica, indicatore:
sciogliere 1,0 g di fenoftaleina in 1000 ml di etanolo.
3.10. Fosforo, soluzione standard madre a 1 g/l di P: pesare 4,3937 g
di KH2PO4 essiccato a 105 C, porli in un matraccio tarato da 1000 ml
e portare a volume con acqua.
3.11. Fosforo, soluzioni standard di lavoro: prelevare dalla
soluzione 3.10, con una buretta di precisione rispettivamente 2,5, 5,
10 e 15 ml e portare a volume, in matracci tarati da 1000 ml, con
acqua. Si ottengono nell'ordine soluzioni standard a 2,5, 5, 10 e 15
mg/l di P.
4. Apparecchiatura
Corrente attrezzatura da laboratorio e in particolare:
4.1. Spettrofotometro vis.
5. Procedimento
5.1. Preparazione del campione per l'analisi
Preparare il campione come descritto nel metodo 2, setacciato a 2 mm.
5.2. Mineralizzazione
5.2.1. Pesare 2,5 g di terreno e porli in un pallone di Kjeldahl da
300 ml. Addizionare 11 ml di acido solforico al 96% (3.1) e alcune
palline di vetro, quindi, lentamente, 4 ml di H2O2 (3.2); far bollire
per 30 minuti. Raffreddare e aggiungere, sempre lentamente, 4 ml di
H2O2 (3.1) e riportare all'ebollizione per altri 30 minuti.
5.2.2. Raffreddare, travasare quantitativamente in un matraccio
tarato da 250 ml, portare a volume con acqua, omogeneizzare e
filtrare.
5.3. Prova in bianco
Effettuare parallelamente una prova in bianco nelle stesse
condizioni, omettendo il campione.
5.4. Colorimetria
5.4.1. Trasferire 10 ml del filtrato in un matraccio da 100 ml e
neutralizzare con NaOH (3.8), indicatore fenolftaleina (3.9), fino al
viraggio dell'indicatore.
5.4.2. Addizionare 30 ml del reagente colorimetrico (3.7) e
completare a volume con acqua. Lasciare a riposo per 60 minuti.
5.4.3. Leggere allo spettrofotometro (4.1) l'estinzione della
soluzione colorata a 700 nm in cuvetta da 20 mm di cammino ottico
contro la prova in bianco.
5.5. Curva di taratura
5.5.1. Preparare la curva di taratura sottoponendo alla stessa
procedura di cui al punto 5.4 10 ml di ciascuna soluzione preparata
come al punto 3.11.
5.5.2. Costruire la curva di taratura mettendo in ordinata
l'estinzione ed in ascissa le concentrazioni di fosforo.
6. Espressione dei risultati
6.1. Il contenuto in fosforo totale si esprime in g/kg, con una cifra
decimale.
6.2. Effettuare i calcoli utilizzando la seguente espressione:
B per D per V
C = ----------------
P
dove:
C e' il fosforo contenuto nel terreno, espresso in g/kg;
B e' la concentrazione di fosforo ricavato dalla curva di taratura,
espresso in mg/l;
D e' il fattore di diluizione;
V e' il volume, espresso in litri (0,250);
P e' la massa del terreno sottoposto ad analisi, in grammi.
6.3. Per esprimere il risultato in P2O5 moltiplicare il valore
trovato per il fattore 2,2914.