METODO 37 DETERMINAZIONE DI FERRO, MANGANESE, ZINCO E RAME ASSIMILABILI (METODO LINDSAY E NORWELL) 1. Oggetto e campo di applicazione 1.1. Descrizione di un metodo per la determinazione di ferro, manganese, zinco e rame "assimilabili". 1.2. Il metodo e' applicabile a tutti i terreni con pH in acqua superiore a 6,5 (cfr. metodo 7). 2. Principio Il metodo prevede l'estrazione dei metalli mediante una soluzione, tamponata a pH = 7,3, a base di DTPA (acido dietilentriamminopentacetico), calcio cloruro e trietanolammina. La determinazione dei cationi estratti viene effettuata per via spettrofotometrica in assorbimento atomico. 3. Reagenti Nel corso dell'analisi utilizzare acqua distillata o di purezza equivalente e reagenti di qualita' analitica riconosciuta. 3.1. Acido cloridrico, HCl, soluzione 1:1 (v/v): diluire 500 ml di HCl al 37% (rho = 1,186) con 500 ml di acqua. 3.2. Soluzione estraente (DTPA 0,005 mol/l, calcio cloruro 0,01 mol/l, trietanolammina 0,1 mol/l): sciogliere 14,92 g di trietanolammina, N(CH2OHCH2)3, in 900 ml di acqua in becher da 1000 ml. Addizionare 1,97 g di acido dietilentriamminopentacetico, DTPA, e 1,47 g di calcio cloruro, CaCl2 per 2H2O, e solubilizzare. Portare il pH della soluzione esattamente a 7,3 piu' o meno 0,05 con HCl (3.1). Travasare quantitativamente in un matraccio tarato da 1000 ml e portare a volume con acqua. Tappare ed omogeneizzare. 3.3. Soluzione estraente per la preparazione degli standard: sciogliere 29,84 g di trietanolammina, N(CH2OHCH2)3, in 900 ml di acqua in becher da 1000 ml. Addizionare 3,94 g di acido dietilentriamminopentacetico, DTPA, e 2,94 g di calcio cloruro, CaCl2 per 2H2O, e solubilizzare. Portare il pH della soluzione esattamente a 7,3 piu' o meno 0,05 con HCl (3.1). Travasare quantitativamente in un matraccio tarato da 1000 ml e portare a volume con acqua. Tappare ed omogeneizzare. 3.4. Acido nitrico, HNO3, soluzione 10 ml/l: diluire 10 ml di HNO3 al 65% (rho = 1,40) in un matraccio tarato da 1000 ml con acqua fino a volume. 3.5. Acido nitrico, HNO3, soluzione 1:1: diluire 500 ml di HNO3 al 65% (rho = 1,40) con 500 ml di acqua. 3.6. Acido cloridrico, HCl, soluzione 10 ml/l: diluire 10 ml di HCl al 37% (rho = 1,186) in un matraccio tarato da 1000 ml con acqua fino a volume. 3.7. Ferro, soluzione standard madre a 1000 mg/l di Fe: pesare 1,0000 g di filo di ferro purissimo per spettrografia e porlo in un becher da 250 ml. Addizionare lentamente 50 ml di HNO3 (3.5) e coprire con un vetro da orologio. Far reagire a temperatura ambiente per 30 minuti e porre quindi il becher a bagnomaria per un'ora. Successivamente scaldare su piastra fino a dissoluzione completa del metallo. Travasare quantitativamente in un matraccio tarato da 1000 ml e portare a volume con acqua. Tappare ed omogeneizzare. 3.8. Manganese, soluzione standard madre a 1000 mg/l di Mn: pesare 1,0000 g di manganese metallico purissimo per spettrografia e porlo in un becher da 250 ml. Addizionare lentamente HNO3 (3.5) nella minor quantita' possibile per solubilizzare il manganese e coprire con un vetro da orologio. Lasciar reagire a temperatura ambiente fino a completa dissoluzione del metallo. Travasare quantitativamente in un matraccio tarato da 1000 ml e portare a volume con HCl (3.6). Tappare ed omogeneizzare. 3.9. Zinco, soluzione standard madre a 1000 mg/l di Zn: pesare 1,0000 g di zinco metallico purissimo per spettrografia e porlo in un becher da 250 ml. Addizionare lentamente HCl (3.1) nella minor quantita' possibile per solubilizzare lo zinco e coprire con un vetro da orologio. Lasciar reagire a temperatura ambiente fino a completa dissoluzione del metallo. Travasare quantitativamente in un matraccio tarato da 1000 ml e portare a volume con HCl (3.6). Tappare ed omogeneizzare. 3.10. Rame, soluzione standard a 1000 mg/l di Cu: pesare 1,0000 g di filo di rame metallico purissimo per spettrografia e porlo in un becher da 250 ml. Addizionare lentamente HNO3 (3.5) nella minor quantita' possibile per solubilizzare il reme e coprire con un vetro da orologio. Lasciar reagire a temperatura ambiente fino a completa dissoluzione del metallo. Travasare quantitativamente in un matraccio tarato da 1000 ml e portare a volume con HNO3 (3.4). Tappare ed omogeneizzare. 3.11. Soluzione standard intermedia a 100 mg/l di ferro e manganese: dalle soluzioni 3.7 e 3.8 prelevare esattamente 100 ml di ciascuno standard trasferendo le aliquote in un matraccio tarato da 1000 ml. Portare a volume con acqua, tappare ed omogeneizzare. 3.12. Soluzione standard intermedia a 100 mg/l di zinco e rame: dalle soluzioni 3.9 e 3.10 prelevare esattamente 100 ml di ciascuno standard trasferendo le aliquote in un matraccio tarato da 1000 ml. Portare a volume con acqua, tappare ed omogeneizzare. Quantita' da prelevare, ml Soluzione 3.11 10,0 25 50 75 100 125 Soluzione 3.12 2,5 5 10 25 50 75 Concentrazioni raggiunte, mg/l Ferro 2,0 5 10 15 20 25 Manganese 2,0 5 10 15 20 25 Zinco 0,5 1 2 5 10 15 Rame 0,5 1 2 5 10 15 Tabella 37.1. Soluzioni standard di lavoro. 3.13. Soluzioni standard di lavoro: dalle soluzioni 3.11 e 3.12 prelevare con buretta di precisione le aliquote indicate in tabella 37.1, ponendole in matracci tarati da 500 ml. Addizionare a ciascun matraccio 250 ml di soluzione 3.3 e portare a volume con acqua. Tappare ed omogeneizzare. Le soluzioni cosi' ottenute hanno le concentrazioni indicate in tabella 37.1. 4. Apparecchiatura Corrente attrezzatura da laboratorio e in particolare: 4.1. Agitatori rotanti a 40 giri al minuto o agitatori oscillanti da 120 a 140 cicli al minuto. 4.2. Spettrofotometro ad assorbimento atomico con eventuale fornetto a grafite. 4.3. Filtri esenti da metalli del tipo Whatman 42. 5. Procedimento 5.1. Preparazione del campione per l'analisi Preparare il campione come descritto nel metodo 2, setacciato a 2 mm. 5.2. Presa del campione Pesare 50 g di terreno porli in un matraccio o in una beuta da 250 ml. 5.3. Estrazione Aggiungere al terreno 100 ml di soluzione estraente (3.2), agitare in agitatore per 120 minuti e filtrare in contenitori di plastica muniti di tappo. 5.4. Curva di taratura 5.4.1. Preparare la curva di taratura allo spettrofotometro in assorbimento atomico con acetilene come combustibile, aria come comburente e le seguenti lunghezze d'onda: Ferro 284,3 nm Manganese 279,5 nm Zinco 213,9 nm Rame 324,8 nm 5.4.2. Definire per lo strumento in dotazione condizioni tali da rispettare la proporzionalita' tra l'assorbanza e la concentrazione delle soluzioni standard di cui al punto 3.13. 5.4.3. Predisporre sullo strumento la lampada specifica per l'elemento da dosare selezionando la lunghezza d'onda riportata in 5.4.1. Azzerare lo spettrofotometro usando come bianco la soluzione 3.2. 5.4.4. Rilevare di seguito le assorbanze delle soluzioni standard di cui al punto 3.13 e costruire la curva di taratura riportando su carta millimetrata in ordinata le assorbanze e in ascissa le relative concentrazioni. 5.5. Dosaggio 5.5.1. Rilevare di seguito le assorbanze delle soluzioni campione dopo aver effettuato, se necessario, le eventuali diluizioni e utilizzando come bianco la soluzione estraente (3.2). 5.5.2. Riportare i valori trovati di assorbanza sulla curva di taratura e leggere i corrispondenti valori di concentrazione. 6. Espressione dei risultati 6.1. I contenuti in ferro, manganese, zinco e rame assimilabili si esprimono in mg/kg, con il seguente numero di cifre decimali: - due, se la concentrazione e' inferiore a 2 mg/kg; - una, se la concentrazione e' compresa tra 2 e 20 mg/kg; - nessuna, se la concentrazione e' superiore a 20 mg/kg. 6.2. Effettuare i calcoli utilizzando la seguente espressione: A per V C = 1000 ---------- P dove: C e' la concentrazione del metallo nel terreno, espressa in mg/kg; A e' la concentrazione del metallo, espressa in mg/l, ricavata dalla curva di taratura; V e' il volume della soluzione estraente, espresso in litri; P e' la massa del terreno sottoposto ad analisi, in grammi.