IL DIRIGENTE GENERALE DEL DIPARTIMENTO
DELLA PREVENZIONE E DEL FARMACO
Visto il decreto legislativo 27 gennaio 1992, n. 120, recante
attuazione delle direttive n. 88/320/CEE e n. 90/18/CEE in materia di
ispezione e verifica della buona prassi di laboratorio;
Vista l'istanza presentata in data 9 febbraio 1994 dal centro di
saggio Istituto di ricerche biomediche "Antoine Marxer" RBM, codice
fiscale e partita Iva n. 0068838013, con sede legale e laboratori in
via Ribes, 1, Colleretto Giacosa (Torino), intesa ad ottenere la
certificazione di conformita' di cui all'art. 5 del citato decreto
legislativo n. 120/1992;
Considerato che la richiesta di cui sopra era intesa ad ottenere
la predetta certificazione di conformita' sia per le prove
tossicologiche ed ecotossicologiche che per prove di biotecnologia;
Visti gli esiti della verifica e della ispezione condotta in data
11 e 12 ottobre 1994;
Vista la richiesta della commissione di coordinamento di cui
all'art. 1 del decreto ministeriale 24 aprile 1992, presa nella
riunione del 10 gennaio 1995, di ottenere il parere della Commissione
europea sulla possibilita' di certificare le prove di biotecnologia
ai sensi della direttiva n. 88/320/CEE e del corrispondente decreto
legislativo n. 120/1992;
Visto il parere favorevole espresso in materia dalla Commissione
europea nella riunione del 21 giugno 1995;
Visti gli esiti della nuova verifica ed ispezione condotta in data
28 e 29 novembre 1995;
In conformita' al parere espresso dalla commissione di
coordinamento di cui all'art. 1 del decreto ministeriale del 24
aprile 1992;
Si certifica
che il centro di saggio Istituto di ricerche biomediche "Antoine
Marxer" RBM, codice fiscale e partita Iva n. 0068838013, con sede
legale e laboratori in via Ribes, 1, Colleretto Giacosa (Torino),
opera conformemente alla buone pratiche di laboratorio ai sensi delle
direttive n. 88/320/CEE per le seguenti prove:
1) Tossicologia.
Gli studi vengono effettuati sulle seguenti specie animali:
roditori: topi, ratti, criceti e cavie;
non roditori: conigli, cani, scimmie.
Le sostanze vengono somministrate per varie vie di
somministrazione tra cui ad esempio:
orale;
endovenosa;
intraperitoneale;
sottocutanea;
cutanea;
intramuscolare;
rettale;
vaginale;
oculare.
1a) Tossicologia generale.
Studi acuti:
determinazione della tossicita' acuta.
Studi di tollerabilita'/irritazionale locale.
Studi a somministrazioni ripetute:
studi di "Dose Range Finding";
studi di palatabilita' con diete medicate;
studi di tossicita' fino ad un anno.
Cancerogenesi in topi, ratti, criceti e per varie vie di
somministrazione.
1b) Tossicologia della riproduzione (ratto-topo-coniglio).
Test preliminari di teratogenesi, fertilita' e peri-post-natali.
Studi di teratogenesi.
Studi peri-post-natali.
Studi di fertilita'.
1c) Immunotossicologia.
Sensibilizzazione su cavia:
Magnusson Maximization test;
Buhler test;
Split adjuvant technique.
Immunogenicita':
studi sulla funzione cellulare su cavia (ipersensibilita' di tipo
ritardato);
studi sulla funzione umorale (anticorpale):
risposta IGG in coniglio, IGE nel topo BALB/c (anafilassi
passiva cutanea);
determinazione di anticorpi in liquidi biologici umani e animali
(tecniche RIPA, RIA, ELISA).
Immunotossicita' su topo:
studi sulla funzionalita' cellulare:
risposta linfocitaria con attivatori cellulari policlonali B e
T;
reazione mista linfocitaria;
ipersensibilita' di tipo ritardato;
reazione del trapianto verso l'ospite;
studi sulla funzionalita' umorale:
risposta anticorpale a SRBC;
studi sulla funzione macrofagica (attivazione citolitica e
citostatica).
1d) Tossicologia genetica.
Test batteriologici in vitro con e senza attivazione metabolica:
test con 5 ceppi di Salmonella typhimurium (Test di Ames);
mutazione inversa con Escherichia coli;
test su piastra con ceppi di Salmonella typhirium e di Escheria
coli;
test su lievito Saccaromyces Cerevisiae.
Test su cellule di mammifero:
mutazione genica (HGPRT) in cellule di Hamster cinese (V79);
test di riparazione di DNA in colture di epatociti di ratto;
test di riparazione di DNA in colture di cellule umane (HeLa).
Test citogenetici in vitro:
aberrazioni cromosomiche in colture di linfociti umani o in
cellule CHO (ovaio di Hamster cinese) o V79;
test di scambio fra cromosomi fratelli (SCE) in colture di
cellule CHO;
analisi citogenetiche: servizio di monitoraggio per esposizioni
professionali.
Test citogenetici in vivo:
test di aberrazione cromosomica in cellule di midollo osseo
roditore;
test del micronucleo in cellule policromatiche di midollo osseo
di roditore;
unscheduled DNA synthesis in cellule di fegato di ratto.
2) Ecotossicologia:
Studi di tossicita' acuta su pesci e daphnie, lombrichi e piante
superiori.
Studi di tossicita' prolungata su pesci e daphnie.
Studi di inibizione di crescita algale.
Biodegradabilita' inerente e "ready".
Bioaccumulo su pesce.
Studi specifici su vari organismi.
Inibizione respirazione fanghi attivi.
3) Studi in vitro:
Studi di citototossicita' su colture cellulari.
Studi in vitro su kit da commercio (Skin Tex).
Studi ex vivo di irritazione su cornea espiantata di bovino
(BCO-P).
Determinazione dell'inibizione/induzione farmacometabolizzante con
kit da commercio.
4) Test specifici richiesti per applicazioni particolari e da
farmacopee:
Validazione di procedure di produzione per eliminare virus lenti
non convenzionali (Virus: 263K Scrapie; virus spiking e procedura di
purificazione microscala).
Saggi biologici.
5) Farmacocinetica:
Studi di farmacocinetica con prodotti marcati.
Studi su roditori (topi, ratti, cavie) e non roditori (conigli,
cani e scimmie) con dosi singole e multiple, per varie vie di
somministrazione.
Studi con disegno cross-over su non-roditori (conigli, cani e
scimmie) per varie vie di somministrazione.
Studi di farmacocinetica con prodotti non marcati.
Vengono effettuati gli stessi di cui sopra per le sostanze
marcate.
Studi aggiuntivi con sostanze marcate:
studi di esecrezione biliare in ratti;
autoradiografia whole body;
studio di distribuzione fetale in ratti e topi;
esecrezione lattea in ratti;
determinazione del legale farmaco-proteico in vitro - ex vivo.
Studi del metabolismo:
profilo di metaboliti urinari e biliari;
metabolismo in vitro;
studi di induzione enzimatica.
Analisi dei farmaci:
sviluppo e validazione di metodiche analitiche su fluidi
biologici (GC, HPLC, GC-MS, HPLC-MS) per nuovi farmaci;
analisi farmaci su fluidi biologici di animali (studi
pre-clinici) e umani (studi di farmacocinetica clinica).
6) Farmacologia recettoriale:
Studi in vivo con vari radioligandi.
Radioceptor assay per determinazione farmacocinetiche in liquidi
biologici.
7) Istopatologia:
Analisi con microscopio a trasmissione (T.E.M.) e a scansione
(S.E.M.).
Preparazione istologica di tessuti.
Preparazione istologica di tessuti T.E.M. e S.E.M.
Valutazione istopatologica e relazioni di patologi veterinari.
Supervisione necroscopica e servizio necroscopia fuori sede.
8) Servizio di laboratorio clinico:
Analisi ematologiche, chimico-cliniche ed urinarie su animali in
studi di sicurezza, non ai fini diagnostici.
9) Analisi d'immagine morfometrica computerizzata per tessuti
patologici.
10) Analisi d'immagine densitometrica computerizzata per binding
recettoriale e farmacocinetica.
11) Biotecnologia:
Validazione delle linee cellulari per produzioni biotecnologiche e
dei loro bulk.
Ricerca di retrovirus murini:
test XC diretto ed esteso;
test S+L- Focus diretto ed esteso;
ricerca di retrovirus xenotropi con test di co-coltivazione;
ricerca di retrovirus ecotropi con test di co-coltivazione;
co-coltivazione con cellule di Rabdomyosarcoma umano.
Ricerca della trascrittasi inversa con e senza induzione chimica
della replicazione retrovirale.
Studi di microscopia elettronica:
in trasmissione;
esame di colture cellulari;
determinazioni quantitative di contaminanti microbici (batteri,
virus, retrovirus, micoplasmi);
scansione;
esame di colture cellulari;
esame di preparati biologici;
valutazioni quantitative mediante analisi di immagine allegata a
microscopia ottica elettronica.
Studi di tumorigenicita':
studi di tumorigenicita' in vitro;
studi di tumorigenicita' in vitro nel topo nudo;
studi di tumorigenicita' in vitro nel topo SCID.
Studi di cariologia.
Ricerca di micoplasmi e batteri:
determinazione micoplasmi con kit da commercio;
determinazione in vitro di batteri e funghi.
Test in vivo per la determinazione dei virus:
test per la ricerca di contaminanti virali nel topo neonato, nel
topo adulto e nella cavia, ricerca di virus su uova embrionate di
pollo.
Test in vitro per la determinazione di virus:
effetto citopatico per co-coltivazione su opportune detector cell
lines;
emagglutinazione/emoadsorbimento.
La presente certificazione si riferisce esclusivamente
all'applicazione da parte del centro di saggio di che trattasi dei
principi di buone pratiche di laboratorio nei saggi citati, restando
pertanto di applicazione per tutti i rimanenti aspetti la normativa
vigente.
Roma, 5 febbraio 1996
Il dirigente generale: SILANO