IL MINISTRO DELL'UNIVERSITA' E DELLA
RICERCA SCIENTIFICA E TECNOLOGICA
Vista la legge 17 febbraio 1982, n. 46: "Interventi per i settori
dell'economia di rilevanza nazionale";
Vista la legge 9 maggio 1989, n. 168: "Istituzione del Ministero
dell'universita' e della ricerca scientifica e tecnologica";
Visto in particolare l'art. 9 della legge 17 febbraio 1982, n. 46,
che dispone l'affidamento da parte del Ministro dell'universita' e
della ricerca scientifica e tecnologica della esecuzione di detti
programmi mediante contratti di ricerca da stipulare con soggetti
scelti in deroga alle norme vigenti sulla contabilita' generale dello
Stato e dopo la pubblicazione nella Gazzetta Ufficiale della
Repubblica italiana degli oggetti specifici delle ricerche;
Vista la legge 5 agosto 1988, n. 346 ed, in particolare, l'art. 5,
comma 2, relativo alle somme del Fondo speciale per la ricerca
applicata con vincolo di destinazione a favore del Mezzogiorno;
Vista la legge 11 marzo 1988, n. 67, che all'art. 15, comma 3,
riserva alla formazione di ricercatori e tecnici di ricerca una quota
non superiore al 10% delle disponibilita' del Fondo speciale per la
ricerca applicata;
Vista la delibera CIPI del 27 ottobre 1988, n. 502, che reca
direttive per il finanziamento dei progetti di formazione di
ricercatori e tecnici di ricerca e, in particolare, il punto 6, che
ne indica le modalita' di attuazione nell'ambito dei programmi
nazionali di ricerca;
Vista la delibera CIPI del 26 novembre 1991, pubblicata nella
Gazzetta Ufficiale n. 39 del 17 febbraio 1992, concernente
l'approvazione del Programma nazionale di ricerca sui sistemi
neurobiologici - tecnologie della trasduzione del segnale, per un
ammontare complessivo di lire 107,7 miliardi, di cui 97,0 miliardi di
lire per attivita' di ricerca e 10,7 miliardi per attivita' di
formazione, nonche', in particolare, il comma 3 ed il punto c)
dell'ultimo comma;
Considerato che nell'attuazione delle procedure previste per i
contratti di ricerca, sono stati definiti, relativamente alle
tematiche approvate, gli oggetti specifici di ricerca e formazione,
da eseguire con singoli contratti, tenendo conto della necessita' di
adeguare gli obiettivi al conseguimento di una pluralita' di
risultati acquisibili alla proprieta' dello Stato;
Decreta:
Art. 1.
1. Il Programma nazionale di ricerca sui sistemi neurobiologici -
tecnologie della trasduzione del segnale, finalizzato allo sviluppo
di tecnologie fortemente innovative e strategiche suscettibili di
traduzione industriale nel medio periodo, definito dal Ministro
dell'universita' e della ricerca scientifica e tecnologica ed
approvato dal CIPI con delibera del 26 novembre 1991 per
l'attivazione di contratti per un ammontare globale massimo di 107,7
miliardi di lire di cui 97,0 miliardi per attivita' di ricerca e 10,7
miliardi per attivita' di formazione, e' articolato nelle
sottoelencate tematiche, comprensive degli oggetti specifici delle
ricerche e delle relative attivita' di formazione.
AREA NEURORECETTORI
Tema 1 - Aspetti genetici e molecolari della risposta fisiologica e
patologica mediata da recettori per neurotrasmettitori.
Oggetto della ricerca:
Messa a punto di metodologie di genetica e biologia molecolare atte
alla definizione dei processi biologici regolati dai recettori per
neurotrasmettitori (in particolare recettori degli aminoacidi
eccitatori e/o recettori colinergici nicotinici) sia in condizioni
fisiologiche che patologiche determinate dall'alterazione delle
funzioni recettoriali. Tali metodologie devono consentire
l'individuazione di almeno due sottotipi recettoriali implicati nei
processi fisiologici e nelle patologie neurodegenerative. Valutazione
tecnico-economica delle metodologie messe a punto rispetto a quelle
eventualmente in uso. Caratterizzazione strutturale e funzionale
delle proteine recettoriali individuate. Caratterizzazione di
composti di sintesi e/o di origine biologica, con potenziale
interesse terapeutico, in grado di interagire con le proteine
recettoriali identificate e/o modulare i meccanismi post-recettoriali
e loro validazione, attraverso la messa a punto di opportuni sistemi
di coltura di cellule neuronali in vitro e/o di modelli animali. La
ricerca si articola in quattro sottotemi:
caratterizzazione, anche mediante tecniche genetico-molecolari, di
almeno due sottotipi di recettori per neurotrasmettitori quali ad
esempio recettori di aminoacidi eccitatori e/o recettori colinergici
nicotinici coinvolti nei processi fisiologici e patologici di
trasduzione del segnale. Valutazione tecnico-economica delle
metodologie messe a punto rispetto a quelle eventualmente in uso;
messa a punto di metodologie e reattivi per l'individuazione di
almeno due delle proteine caratterizzate in sistemi di colture
neuronali in vitro e/o in modelli animali. Applicazione dei sistemi
sviluppati alla definizione dei meccanismi di trasduzione del segnale
in condizioni normali e nelle alterazioni patologiche d'interesse.
Valutazione tecnico-economica delle metodologie messe a punto
rispetto a quelle eventualmente in uso;
messa a punto di saggi biologico-molecolari e/o biochimici e/o
elettrofisiologici per la determinazione delle proprieta' strutturali
e funzionali delle proteine di interesse in particolare per quanto
riguarda i siti di interazione tra ligando e recettore e/o tra
recettore e trasduttori intracellulari. Valutazione tecnico-economica
delle metodologie messe a punto rispetto a quelle eventualmente in
uso. Applicazione dei saggi sviluppati per l'analisi dell'affinita' e
specificita' di almeno due composti naturali o di sintesi, anche
innovativi, interagenti con recettori e/o con i trasduttori post-
recettoriali, e potenzialmente utilizzabili per interventi
terapeutici in relazione alle patologie di interesse. Validazione
biologico-funzionale dei prodotti considerati e loro valutazione in
termini di costo/benefici rispetto a prodotti in uso;
messa a punto di tecnologie genetico-molecolari e/o immunologiche
per lo sviluppo di reattivi strategici (sonde geniche, anticorpi
specifici) per l'applicazione analitica nell'individuazione di almeno
due sottotipi recettoriali e/o di effettori intracellulari
associabili alle patologie dei processi di trasduzione del segnale
individuate. Valutazione tecnico-economica delle metodologie messe a
punto rispetto a quelle eventualmente
in uso.
Tempo: la durata massima della ricerca non deve superare i
trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
dodicimila milioni di lire.
Attivita' di formazione:
Formazione di ricercatori e tecnici altamente qualificati,
orientati allo studio delle caratteristiche strutturali e funzionali
di neurorecettori di membrana. Acquisizione delle tecniche genetico-
molecolari per la clonazione e l'espressione in vitro di recettori di
membrana. I relativi percorsi formativi devono avere una durata non
inferiore a due e non superiore a tre anni.
Tempo: la durata massima dell'attivita' di formazione non deve
superare i trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
mille milioni di lire.
Tema 2 - Aspetti genetico-molecolari della risposta fisiologica e
patologica dei recettori endocellulari.
Oggetto della ricerca:
Messa a punto di metodologie di genetica e biologia molecolare per
lo studio dell'espressione e del meccanismo d'azione dei recettori
endocellulari coinvolti nella regolazione del flusso di ioni
attraverso le membrane che compartimentalizzano il citoplasma, delle
proteasi specifiche per il citoscheletro e dei complessi
macromolecolari responsabili della traslocazione di substrati
energetici attraverso le membrane endocellulari. Tali metodologie
devono consentire la valutazione dei livelli di espressione dei
recettori endocellulari di interesse e la definizione della loro
attivita' in differenti tessuti sia in condizioni fisiologiche che
patologiche con particolare riferimento ad alcune con elevato
interesse socio-sanitario quali l'ischemia cerebrale e miocardica,
l'ipertensione e lo scompenso cardiaco. Valutazione tecnico-economica
delle metodologie messe a punto rispetto a quelle eventualmente in
uso. Identificazione e caratterizzazione di prodotti anche innovativi
in grado di modulare il livello di espressione e/o il meccanismo
d'azione dei recettori endocellulari studiati. Validazione biologica,
funzionale, e farmacodinamica dei prodotti considerati e loro
valutazione in termini di costo/beneficio rispetto a prodotti in uso.
La ricerca si articola in quattro sottotemi:
messa a punto, anche con tecniche di genetica molecolare, di
metodologie per lo studio dei sistemi macromolecolari di trasporto di
substrati energetici dal citosol al compartimento intramitocondiale.
Espressione di almeno due delle componenti proteiche dei sistemi
suddetti in microorganismi e/o in cellule eucariotiche. Produzione di
almeno due peptidi sintetici contenenti epitopi atti allo sviluppo di
reagenti specifici. Messa a punto di metodi sensibili per la misura
dell'attivita' dei sistemi recettoriali endocellulari indagati, in
condizioni patologiche, quali l'ischemia cerebrale e miocardica,
l'ipertensione e lo scompenso cardiaco. Valutazione tecnico-economica
delle metodologie messe a punto rispetto a quelle eventualmente in
uso;
messa a punto di metodologie per la definizione dei meccanismi di
trasporto di differenti ioni attraverso le membrane che
compartimentalizzano l'ambiente endocellulare. Valutazione tecnico-
economica delle metodologie messe a punto rispetto a quelle
eventualmente in uso. Individuazione e caratterizzazione di composti
chimici e/o biologici in grado di interferire selettivamente con i
vari meccanismi di trasporto di ioni. Validazione biologica,
funzionale e farmacodinamica dei prodotti considerati e loro
valutazione in termini di costo/beneficio rispetto a prodotti in uso;
messa a punto di metodi, anche di biologia molecolare, per lo stu-
dio dell'attivazione e della regolazione di almeno un sistema di
proteasi endocellulare quale ad esempio il sistema
calpainacalpastatina. Tali metodi devono chiarire l'influenza del
sistema indagato sulla fisiologia cellulare (contrazione, capacita'
secretive, adesivita') e le sue alterazioni in condizioni patologiche
quali l'ischemia miocardica, l'ipertensione, le epatopatie,
l'ischemia e l'anossia cerebrale. Individuazione e caratterizzazione
di composti naturali e/oz di sintesi in grado di interferire con la
regolazione del sistema indagato. Validazione biologico-funzionale
dei prodotti considerati e loro valutazione in termini di
costo/beneficio rispetto ai prodotti in uso;
messa a punto di metodologie, anche di biologia molecolare, per la
definizione dei meccanismi che regolano la sintesi delle proteine
citoscheletriche nonche' il loro coinvolgimento nel trasporto
endocellulare. Tali metodologie devono garantire la corretta
valutazione delle modificazioni dell'attivita' e/o della
concentrazione di tali proteine in condizioni patologiche quali
l'ischemia miocardica e cerebrale e lo scompenso cardiaco.
Valutazione tecnico-economica delle metodologie messe a punto
rispetto a quelle eventualmente in uso. Sviluppo di modelli animali
per la messa a punto di strategie per l'intervento farmacologico
nelle condizioni patologiche considerate.
Tempo: la durata massima della ricerca non deve superare i
trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
tredicimila milioni di lire.
Attivita' di formazione:
Formazione di ricercatori e tecnici altamente qualificati,
orientati allo studio di recettori endocellulari che regolano il
flusso di ioni e di altre molecole tra i vari compartimenti
intracellulari. Acquisizione di conoscenze applicative orientate alla
biologia cellulare e molecolare ed alla farmacodinamica. I relativi
singoli percorsi formativi devono avere una durata non inferiore a
due e non superiore a tre anni.
Tempo: la durata massima dell'attivita' di formazione non deve
superare i trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
millecinquecento milioni di lire.
Tema 3 - Aspetti molecolari della produzione di fattori coinvolti
nella crescita, maturazione e rigenerazione del sistema nervoso,
della loro interazione con i recettori specifici e del meccanismo di
induzione degli effetti trofici.
Oggetto della ricerca:
Messa a punto di metodologie di genetica e biologia molecolare per
lo studio di fattori di natura proteica implicati a vario livello
nello sviluppo, maturazione e rigenerazione del tessuto nervoso,
anche attraverso la modulazione della risposta di almeno un asse
neuroendocrino e di almeno un tipo cellulare immunocompetente. Tali
metodologie devono permettere l'identificazione di geni che
codificano per fattori neurotrofici e la caratterizzazione della
regolazione della loro espressione, nonche' delle interazioni tra le
proteine da essi codificate e tra queste ed altri effettori. Messa a
punto di metodologie per lo studio dei processi di trasduzione del
segnale indotto dalle proteine identificate. I meccanismi studiati
dovranno essere correlati con stati patologici di interesse
neurologico e neuroimmunologico di particolare rilevanza sociale in
relazione alla loro cronicita' ed al grado di disabilita' risultante.
Valutazione tecnico-economica delle metodologie messe a punto
rispetto a quelle eventualmente in uso, con particolare riguardo alla
ricaduta applicativa dei risultati in termini di messa a punto di
strumenti preventivi e/o terapeutici. La ricerca si articola in
quattro sottotemi:
messa a punto di metodologie volte a definire il significato
funzionale del nerve growth factor (NGF) nell'ambito del sistema
nervoso con particolare riferimento alla sua possibile azione
modulatoria su almeno un asse neuroendocrino, ad esempio l'asse
ipotalamo-ipofisi-surrene, nonche' su fenomeni di tipo immunitario.
Tali metodologie devono identificare i punti di disregolazione
rilevanti per gli stati patologici considerati e le possibili
ricadute terapeutiche. Valutazione tecnico-economica delle
metodologie sviluppate rispetto a quelle eventualmente in uso;
messa a punto di metodologie di biologia molecolare per la
caratterizzazione del meccanismo di trasduzione del segnale mediato
da NGF e da altri fattori neurotrofici (NT). Identificazione e
clonaggio di almeno due geni attivati e/o repressi dagli NT e dei
rispettivi recettori, al fine di identificare le alterazioni di
rilievo per le patologie considerate ed i possibili bersagli per
interventi preventivi e/o terapeutici. Valutazione tecnico-economica
delle metodologie sviluppate rispetto a quelle eventualmente in uso;
identificazione, caratterizzazione ed isolamento in forma pura di
almeno due fattori di natura proteica ad azione neurotrofica e ad
azione neuroprotettiva nei confronti di agenti neurotossici
differenti da quelli individuati nel secondo sottotema. Validazione
biologico-funzionale di fattori identificati anche in relazione a
fattori neurotrofici noti e loro valutazione in termini di
costo/beneficio in rapporto a potenziali applicazioni terapeutiche;
messa a punto di modelli animali, anche transgenici, e di modelli
cellulari in vitro, correlabili alle patologie neurologiche e
neuroimmunologiche considerate. Applicazione dei modelli sviluppati
per la definizione della rilevanza eziopatogenetica delle alterazioni
dei meccanismi suddetti nonche' dei possibili interventi terapeutici
nelle patologie considerate, anche attraverso la messa a punto di
tecnologie genetico-molecolari di espressione e produzione, in
cellule non linfoidi, di anticorpi contro neuropeptidi e/o agenti
neurotossici. Valutazione tecnico-economica delle metodologie
sviluppate rispetto a quelle eventualmente in uso.
Tempo: la durata massima della ricerca non deve superare i
trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare gli
ottomila milioni di lire.
Attivita' di formazione:
Formazione di ricercatori e tecnici altamente qualificati,
orientati allo studio degli aspetti molecolari coinvolti nella
maturazione e rigenerazione del sistema nervoso. Acquisizione delle
tecniche genetico-molecolari per la clonazione, l'espansione e
l'isolamento di fattori neurotrofici. I relativi singoli percorsi
formativi devono avere una durata non inferiore a due e non superiore
a tre anni.
Tempo: la durata massima dell'attivita' di formazione non deve
superare i trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non
deve superare i mille milioni di lire.
Tema 4 - Caratterizzazione genetico-molecolare dei meccanismi di
trasduzione del segnale.
Oggetto della ricerca:
Messa a punto di metodologie per la caratterizzazione dei processi
biologici di trasduzione del segnale mediati da proteine
recettoriali, a sette o piu' di sette domini transmembrana,
specifiche per neurotrasmettitori (in particolare glutammato e amine
biologiche) e sostanze psicoattive, quali ad esempio cannabinoidi,
opiacei, e le proteine trasduttrici leganti GTP (G-proteine). Tali
metodologie devono permettere l'individuazione dei singoli sottotipi
recettoriali e delle proteine trasduttrici nonche' la
caratterizzazione delle varianti geniche correlabili a stati
patologici neurodegenerativi e/o derivanti da abuso delle sostanze
psicoattive considerate. Messa a punto di tecniche di
caratterizzazione della struttura, della topologia e della funzione
delle proteine in oggetto. Individuazione di composti di sintesi,
anche innovativi, di potenziale impiego terapeutico, atti ad
interagire con le molecole recettoriali e trasduttrici, attraverso la
messa a punto di opportuni sistemi per l'espressione delle proteine
di interesse in microorganismi e/o in linee cellulari in coltura e/o
in modelli animali. Validazione biologico/funzionale dei prodotti
considerati e loro valutazione in termini di costo/beneficio rispetto
ai prodotti in uso. Sviluppo di metodologie genetico-molecolari atte
all'impiego diagnostico per l'individuazione delle proteine
recettoriali e trasduttrici e/o delle loro varianti sopra considerate
associabili alle situazioni patologiche di interesse. Valutazione
tecnico-economica delle metodologie messe a punto rispetto a quelle
eventualmente in uso. La ricerca si articola in quattro sottotemi:
messa a punto di tecniche genetico-molecolari per la
individuazione di almeno due proteine recettoriali, a sette o piu' di
sette domini transmembrana, quali ad esempio il recettore
metabotropico del glutammato, i recettori per amine biologiche, i
recettori per sostanze psicoattive e/o loro varianti geniche,
coinvolte nelle patologie neurodegenerative e da abuso di sostanze
psicoattive. Caratterizzazione ed eventuale clonaggio e
sequenziamento dei geni codificanti le proteine individuate.
Valutazione tecnico-economica delle metodologie messe a punto
rispetto a quelle eventualmente in uso;
messa a punto di metodologie e reattivi per l'espressione delle
proteine individuate in sistemi microbici (batteri e/o lieviti), e/o
in linee cellulari in coltura e/o in modelli animali. Applicazione
dei sistemi sviluppati all'espressione di almeno due proteine
recettoriali, almeno due proteine trasduttrici del segnale (in
particolare G-proteine associate ai recettori) e/o loro varianti
correlabili alle alterazioni patologiche d'interesse. Valutazione
tecnico-economica delle metodologie messe a punto rispetto a quelle
eventualmente in uso;
messa a punto di saggi specifici, mediante applicazione dei
sistemi d'espressione sviluppati, per la determinazione delle
proprieta' strutturali, topologiche e funzionali delle proteine
espresse, in particolare per quanto riguarda i siti di interazione
tra ligando e recettore e tra recettore e G-proteina trasduttrice.
Valutazione tecnico-economica delle metodologie messe a punto
rispetto a quelle eventualmente in uso. Applicazione dei saggi
sviluppati per la definizione dell'affinita' e specificita' di almeno
due composti naturali o di sintesi, anche innovativi, interagenti con
i recettori e/o con le G-proteine trasduttrici e potenzialmente
utilizzabili per interventi terapeutici in relazione alle patologie
d'interesse. Validazione biologico-funzionale dei prodotti
considerati e loro valutazione in termini di costo/b/eneficio
rispetto ai prodotti in uso;
messa a punto di tecnologie genetico-molecolari per lo sviluppo di
reattivi strategici (sonde geniche) da applicare in sistemi
diagnostici ad elevata sensibilita' e specificita' per
l'individuazione di almeno due proteine recettoriali e/o trasduttrici
e/o loro varianti geniche associabili alle patologie dei processi di
trasduzione del segnale sopra identificate. Valutazione tecnico-
economica delle metodologie messe a punto rispetto a quelle
eventualmente in uso.
Tempo: la durata massima della ricerca non deve superare i
trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
dodicimila milioni di lire.
Attivita' di formazione:
Formazione di ricercatori e tecnici altamente qualificati,
orientati allo studio dei processi di trasduzione del segnale mediati
da recettori interagenti con G-proteine. Acquisizione di tecniche di
clonazione e di espressione in microorganismi e in cellule in coltura
di recettori di membrana. I relativi singoli percorsi formativi
devono avere una durata non inferiore a due e non superiore a tre
anni.
Tempo: la durata massima dell'attivita' di formazione non deve
superare i trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
millecinquecento milioni di lire.
Tema 5 - Caratterizzazione genetico-molecolare dei recettori virali
e produzione di recettori chimerici.
Oggetto della ricerca:
Messa a punto di metodologie per la caratterizzazione dei processi
biologici coinvolti nelle interazioni tra virus e proteine di
membrana con funzioni di recettori per virus epatotropi (HBV, HAV,
HCV, HDV) e delle reazioni metaboliche intracellulari indotte dai
processi di trasduzione del segnale mediati dall'interazione tra vi-
rus e recettore. Caratterizzazione delle strutture virali
responsabili della interazione con la membrana cellulare e sviluppo
di metodi per la generazione di varianti strutturali di potenziale
impiego diagnostico e/o terapeutico nelle patologie associate alla
infezione virale. Caratterizzazione strutturale e funzionale dei
diversi domini proteici, sia virali che recettoriali, coinvolti nelle
interazioni virus-recettore, anche attraverso la produzione di
analoghi strutturali che mimano o inibiscono tali interazioni. Messa
a punto di tecniche genetico-molecolari per la costruzione di
recettori chimerici, da utilizzare nella definizione della struttura,
della topologia e della funzione di recettori di membrana a singola e
multiple subunita'. Caratterizzazione delle proprieta' dei domini
recettoriali coinvolti nelle alterazioni ligando-recettore e
recettore-proteine trasduttrici intracellulari. Produzione di peptidi
sintetici corrispondenti ai domini funzionali dei recettori chimerici
sopra citati. Valutazione tecnico-economica delle metodologie messe a
punto rispetto a quelle eventualmente in uso. La ricerca si articola
in quattro sottotemi:
individuazione, mediante tecniche genetico-molecolari e/o
immunologiche, di almeno una proteina recettoriale di membrana
specifica per virus epatotropi (recettore di HBV o HAV o HCV o HDV).
Caratterizzazione delle reazioni metaboliche intracellulari indotte
dai processi di trasduzione del segnale mediati dall'interazione tra
virus e recettore. Clonazione e sequenziamento del gene codificante
la proteina individuata. Valutazione tecnico-economica delle
metodologie messe a punto rispetto a quelle eventualmente in uso;
messa a punto di metodologie e reattivi per la definizione delle
proprieta' strutturali e funzionali dei vari domini proteici che
costituiscono il recettore virale identificato e dei domini proteici
virali coinvolti nell'interazione con i recettori di membrana. Messa
a punto di tecnologie per la produzione di recettori chimerici
(chimere tra recettore dell'interleuchina-6 e recettori di membrana
anche virali) per lo studio dei domini proteici responsabili
dell'interazione ligando-recettore. Individuazione di varianti
strutturali di potenziale impiego diagnostico e terapeutico mediante
selezione di strutture proteiche casuali espresse sulla superficie di
microorganismi. Valutazione tecnico-economica delle metodologie messe
a punto rispetto a quelle eventualmene in uso;
messa a punto di tecnologie genetico-molecolari per la produzione
di almeno due recettori chimerici a singola subunita' mediante
costruzione di geni sintetici e loro espressione in microorganismi.
Utilizzo delle chimere espresse per la definizione dei domini
proteici coinvolti nelle interazioni ligando-recettore e recettore-
proteina trasduttrice e la caratterizzazione delle proprieta'
strutturali e funzionali dei domini proteici sopra definiti.
Valutazione tecnico-economica delle metodologie messe a punto
rispetto a quelle eventualmente in uso;
messa a punto di tecnologie per la costruzione di peptidi
sintetici capaci di mimare le funzioni dei domini proteici dei
recettori chimerici sopra descritti. Valutazione tecnico-economica
delle metodologie messe a punto rispetto a quelle eventualmente in
uso. Produzione di almeno due peptidi sintetici corrispondenti ai
domini citoplasmatici dei recettori chimerici responsabili
dell'interazione con le proteine trasduttrici. Validazione biologico-
funzionale dei prodotti considerati e loro valutazione in termini di
costo/beneficio rispetto ai prodotti in uso.
Tempo: la durata massima della ricerca non deve superare i
trentasei mesi.
Spese: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
sedicimila milioni di lire.
Attivita' di formazione:
Formazione di ricercatori e tecnici altamente qualificati,
orientati alla caratterizzazione strutturale e funzionale di
recettori virali. Acquisizione delle tecniche genetico molecolari
immunologiche per l'individuazione di recettori virali e per la
costruzione di recettori chimerici. I relativi singoli percorsi
formativi devono avere una durata non inferiore a due e non superiore
a tre anni.
Tempo: la durata massima della ricerca non deve superare i
trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
millesettecento milioni di lire.
Tema 6 - Caratterizzazione genetico-molecolare della modulazione
della risposta immunitaria con particolare riguardo all'interazione
con S.N.C.
Oggetto della ricerca:
Messa a punto di metodologie genetico-molecolari per la definizione
dei meccanismi coinvolti nella modulazione della risposta immune a
diversi segnali, in grado di differenziare specificamente situazioni
fisiologiche e condizioni patologiche di tipo neuroimmune. Le
patologie considerate dovranno rivestire carattere di particolare
rilevanza sociale in relazione alla loro cronicita' ed al grado di
disabilita' risultante. I meccanismi indagati saranno correlati con
gli stati patologici considerati anche attraverso la messa a punto di
corrispondenti modelli animali e la messa a punto di modelli per lo
studio dei meccanismi di regolazione endogena ed esogena
dell'attivazione linfocitaria. Valutazione tecnico-economica delle
metodologie messe a punto rispetto a quelle eventualmente in uso, con
particolare riguardo alla ricaduta applicativa dei risultati in
termini di messa a punto di strumenti preventivi e/o terapeutici. La
ricerca si articola in cinque sottotemi:
messa a punto di tecnologie genetico-molecolari per
l'identificazione e la definizione dei meccanismi di espressione
genica, di sintesi e di rilascio di almeno due molecole di
provenienza nervosa, che esercitano effetti regolatori sul sistema
immunitario. Sviluppo di metodologie atte allo studio della
regolazione dei suddetti meccanismi da parte delle molecole di
origine immunitaria, quali ad esempio le citochine, anche in seguito
ad insulti di natura tossica, traumatica ed infettiva del sistema
nervoso centrale. Messa a punto di metodologie per la
caratterizzazione in vitro di almeno due tipi di cellule effettrici
immunocompetenti e dei meccanismi di interazione tra le molecole di
provenienza nervosa identificate ed i loro recettori. Identificazione
e caratterizzazione di detti recettori, e dei processi di trasduzione
del segnale da essi mediati. Valutazione dell'implicazione
dell'alterazione di tali meccanismi e dei conseguenti processi di
trasduzione ai fini della messa a punto di possibili strumenti
terapeutici. Valutazione tecnico-economica delle metodologie
sviluppate rispetto a quelle eventualmente in uso;
messa a punto di metodiche genetico-molecolari per lo studio di
meccanismi di interazione crociata tra le molecole di provenienza
nervosa e le citochine e i loro recettori, in almeno due tipi di
cellule immunocompetenti. Identificazione e clonaggio di almeno due
recettori delle citochine. Caratterizzazione strutturale e funzionale
dei recettori clonati per l'identificazione di possibili bersagli di
tipo farmacologico. Valutazione tecnico-economica delle metodologie
sviluppate rispetto a quelle eventualmente in uso;
messa a punto di tecnologie per la definizione dei meccanismi di
trasduzione dei segnali mediati dalle molecole di origine nervosa e
non e dalle citochine, considerati sia a livello intracellulare, con
particolare attenzione ai fenomeni di morte cellulare programmata,
sia a livello extracellulare, con particolare riguardo ai fenomeni
connessi al rilascio di molecole dotate di capacita' mitotiche e/o
chemiotattiche, ovvero inducenti/stimolanti l'espressione di
specifiche proteine, nonche' aventi proprieta' citotossiche.
Valutazione tecnico-economica delle metodologie sviluppate rispetto a
quelle eventualmente in uso;
messa a punto di tecnologie volte a chiarire i meccanismi extra
intracellulari della risposta delle cellule immunoeffettrici, con
particolare riguardo alla regolazione mediata da molecole endogene di
tipo ormonale, quali ad esempio gli ormoni steroidei, e non ormonale,
al fine di identificare adeguati strumenti terapeutici innovativi per
patologie umane con eziopatogenesi neuroimmune. Valutazione tecnico-
economica delle metodologie sviluppate rispetto a quelle
eventualmente in uso;
messa a punto di modelli animali anche di tipo transgenico, adatti
allo studio dei meccanismi eziopatogenetici delle patologie umane di
tipo neuroimmune identificate, anche al fine di definire potenziali
strumenti terapeutici innovativi. Valutazione tecnico-economica delle
metodologie sviluppate rispetto a quelle eventualmente in uso.
Tempo: la durata massima della ricerca non deve superare i
trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
sedicimila milioni di lire.
Attivita' di formazione:
Formazione di ricercatori e tecnici altamente qualificati,
orientati allo studio della risposta immunitaria e delle interazioni
tra sistema immunitario e sistema nervoso centrale. Acquisizione
delle tecniche genetiche, biochimiche e fisiologiche applicabili allo
studio del sistema immunitario. I relativi singoli percorsi formativi
devono avere una durata non inferiore a due e non superiore a tre
anni.
Tempo: la durata massima dell'attivita' di formazione non deve
superare i trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
duemila milioni di lire.
AREA DIAGNOSTICA
Tema 7 - Sviluppo di metodi diagnostici per la determinazione di
fenomeni autoimmuni responsabili di danni anatomici e funzionali del
S.N.C.
Oggetto della ricerca:
Sviluppo di tecnologie avanzate per l'identificazione e la
caratterizzazione di recettori per l'antigene dei linfociti T
coinvolti nella patogenesi di malattie quali la sclerosi multipla, la
miastenia grave, le sequele neurologiche post-vacciniche, le
encefaliti post-infettive, le polineuriti demielinizzanti,
caratterizzate da una risposta immunitaria umorale e/o cellulo-
mediata verso costituenti del sistema nervoso centrale. Le
tecnologie sviluppate dovranno permettere la messa a punto di metodi
diagnostici per l'individuazione e caratterizzazione di tali
recettori in campioni biologici e la successiva produzione di kit
pilota per la diagnosi anche precoce di tre malattie autoimmuni del
S.N.C. ad elevato interesse sociale. Valutazione dell'applicabilita'
dei metodi sviluppati anche in settori diversi da quelli a cui sono
specificamente indirizzati. Validazione tecnico-economica dei kit
sviluppati anche in termini di praticita' operativa dei saggi,
relativamente al loro reale valore diagnostico. La ricerca si
articola in tre sottotemi:
sviluppo e messa a punto di tecniche di genetica e di biologia
molecolare per la caratterizzazione dei prodotti dei geni del
recettore delle cellule T preferenzialmente coinvolti nelle risposte
autoimmuni agli antigeni del S.N.C. Tali tecniche devono consentire,
anche su quantita' minime di campioni biologici, l'individuazione
dell'espressione di tali geni, con un livello di sensibilita'
significativamente superiore a quello ottenibile con le tecnologie
attualmente in uso, nonche' la valutazione del reale coinvolgimento
dei loro prodotti in almeno tre malattie autoimmuni del S.N.C.
Espressione di tali geni in cellule batteriche o eucariote e/o
produzione di peptidi sintetici contenenti epitopi immunogenici per
lo sviluppo di reagenti specifici. Verifica della presenza di tali
epitopi sulla proteina nativa espressa dalle cellule coinvolte nei
processi autoimmuni identificati, mediante opportuni saggi biologici.
Verifica tecnico-economica di trasferibilita' su scala industriale
delle proteine prodotte;
sviluppo di prodotti innovativi, quali anticorpi monoclonali
specifici e/o sonde genetiche ad elevata specificita' e sensibilita',
in grado di identificare selettivamente l'espressione dei geni
caratterizzati nel primo sottotema. Sviluppo delle specifiche
tecniche di applicazione atte a garantire la massima efficacia dei
prodotti ottenuti e l'economicita' del loro impiego in nuovi sistemi
diagnostici. Verifica della applicabilita' generale di tali sistemi
su diverse tipologie di campione biologico ed in particolare su
microcampioni. Validazione a livello di laboratorio dei sistemi messi
a punto per le diverse tipologie di impiego considerate. Valutazione
dei prodotti e delle relative tecniche di impiego mediante un numero
significativo di prove su casistiche appropriate. Valutazione della
rispondenza in termini di costo/beneficio rispetto ai prodotti-
sistemi eventualmente esistenti;
definizione di protocolli di produzione su larga scala e di
standardizzazione delle procedure di preparazione e di controllo dei
reagenti e delle componenti sviluppati nei precedenti sottotemi.
Definizione di protocolli per la validazione sperimentale dei metodi
di identificazione dei recettori implicati nelle tre tipologie di
danno del S.N.C. identificate. Produzione di una serie pilota
standardizzata dei tre kit diagnostici prototipo sviluppati e loro
convalida metodologica e clinica. Valutazione della rispondenza in
termini di costo/beneficio rispetto ad eventuali metodi diagnostici
esistenti.
Tempo: la durata massima della ricerca non deve superare i
trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
novemila milioni di lire.
Attivita' di formazione:
Formazione di ricercatori e tecnici altamente qualificati nel campo
della biologia molecolare e cellulare con particolare riferimento
allo sviluppo di metodi diagnostici applicabili alle patologie
autoimmuni. Acquisizione delle tecniche immunologiche e di
espressione genica in cellule procarioti ed eucarioti. I relativi
singoli percorsi formativi devono avere una durata non inferiore a
due e non superiore a tre anni.
Tempo: la durata massima dell'attivita' di formazione non deve
superare i trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
mille milioni di lire.
Tema 8 - Caratterizzazione in vivo del metabolismo cellulare e
dello stato funzionale dei sistemi di trasmissione neuronale.
Oggetto della ricerca:
Sviluppo di tecnologie e di metodologie di radiochimica e di
tomografia da emissione di positroni (PET) atte allo studio della
biodistribuzione, della farmacocinetica e della farmacodinamica di
principi attivi rappresentativi di classi di molecole che agiscono su
diverse patologie, quali ad esempio le demenze, le malattie
cerebrovascolari, le malattie extrapiramidali, l'epilessia, le
patologie psichiatriche. Valutazione dell'efficacia terapeutica di
tali principi attivi sulla funzionalita' globale e distrettuale del
cervello e in particolare sulla perfusione regionale cerebrale, sul
metabolismo regionale cerebrale di ossigeno e/o glucosio,
sull'attivita' dei sistemi di trasmissione neuronale. Validazione
tecnico-economica delle procedure PET con particolare riferimento
agli avanzamenti diagnostici e all'ottimizzazione delle terapie
consentiti da queste metodiche rispetto alle altre metodiche di
indagine strumentale potenzialmente disponibili. La ricerca si
articola in tre sottotemi:
sviluppo di metodologie atte alla produzione di precursori per la
marcatura, con isotopi ad emissione di positroni quali F-18 e C-11,
di principi attivi rappresentativi di classi di molecole con effetto
terapeutico su patologie, quali ad esempio le demenze, le malattie
cerebrovascolari, l'epilessia, le malattie extrapiramidali, le
patologie psichiatriche. In particolare tali metodologie dovranno
permettere l'identificazione delle posizioni in cui introdurre i
radiotraccianti nelle molecole considerate e l'ottimizzazione delle
procedure di introduzione del radioisotopo nella molecola. Sviluppo
di almeno due principi attivi tra quelli considerati da marcare con
F-18 o C-11 e messa a punto di protocolli per lo studio della
biodistribuzione di tali molecole. Verifica mediante tecniche di
controllo di qualita' della corretta marcatura dei principi attivi;
sviluppo di metodologie atte alla valutazione mediante PET
dell'effetto sulla perfusione e sul metabolismo regionale cerebrale
di principi attivi rappresentativi di classi di molecole che agiscono
su patologie che alterano parametri misurabili mediante PET. In
particolare tali metodologie devono permettere la quantificazione
mediante PET dell'effetto sulla perfusione e/o sul metabolismo
regionale cerebrale di almeno due principi attivi in stati patologici
in cui siano presenti alterazioni della funzionalita' cerebrale,
quali ad esempio le demenze, le malattie cerebrovascolari, le
malattie extrapiramidali, l'epilessia, le patologie psichiatriche, al
fine di valutarne l'efficacia terapeutica dopo somministrazione acuta
e/o cronica. Le stesse metodologie devono altresi' consentire la
valutazione mediante PET dell'effetto sulla perfusione regionale
cerebrale di almeno due principi attivi sulle funzioni corticali, con
particolare riferimento alle modificazioni indotte in aree cerebrali
attivate dallo svolgimento di compiti cognitivi e delle funzioni
primarie del cervello. Confronto tra l'attivazione neuronale indotta
da un certo compito prima e dopo la somministrazione del principio
attivo. Validazione tecnico economica delle metodologie messe a punto
rispetto ad eventuali metodologie in uso;
sviluppo di metodologie atte allo studio di sistemi di
trasmissione neuronali o delle vie di regolazione ormonale, al fine
di valutare in vivo variabili quali l'espressione recettoriale o la
funzionalita' dei sistemi deputati alla regolazione dei processi che
sottendono all'attivita' trasmettitoriale. Valutazione dell'effetto
di almeno due principi attivi su tali variabili. Messa a punto delle
tecniche di marcatura con isotopi emittenti positroni quali F-18 e
C-11 di molecole ad alta affinita' per il sistema trasmettitoriale di
interesse. Valutazione in vivo della espressione recettoriale e della
funzionalita' dei sistemi trasmettitoriali in condizioni fisiologiche
e patologiche, quali ad esempio le patologie degenerative del sistema
nervoso centrale, le patologie psichiatriche e i tumori, al fine di
ottimizzarne la diagnosi ed il conseguente approccio terapeutico.
Valutazione in vivo della potenza di almeno due principi attivi su un
dato sistema neurochimico e dei livelli di occupazione recettoriale
indicativi dell'esplicazione dell'effetto terapeutico e/o della
possibile comparsa di effetti collaterali in seguito alla
somministrazione dei principi attivi considerati. Validazione
tecnico-economica delle procedure PET, con particolare riferimento
agli avanzamenti diagnostici e all'ottimizzazione delle terapie
consentiti da queste metodiche rispetto ad altre metodiche di
indagine strumentale potenzialmente disponibili.
Tempo: la durata massima della ricerca non deve superare i
trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare gli
undicimila milioni di lire.
Attivita' di formazione:
Formazione di ricercatori e tecnici altamente qualificati,
orientati alla produzione di molecole farmacologicamente attive, alla
loro marcatura con isotopi ad emissione di positroni, ed allo studio
della biodistribuzione, della farmacocinetica e della farmacodinamica
di tali molecole. Sviluppo di competenze applicate orientate alla
chimica, biochimica, farmacologia ed alle tecniche di rivelazione con
tomografia ad emissione di positroni. I relativi singoli percorsi
formativi dovranno avere una durata non inferiore ai due anni e non
superiore ai tre anni.
Tempo: la durata massima dell'attivita' di formazione non deve
superare i trentasei mesi.
Spesa: la spesa massima, comprensiva di IVA, non deve superare i
mille milioni di lire.
In relazione alle attivita' scientifiche e di sviluppo in atto nel
Mezzogiorno i temi sopra specificati numeri 5 e 6, del Programma
nazionale di ricerca sui sistemi neurobiologici - Tecnologie per la
trasduzione del segnale - devono essere sviluppati nelle aree
meridionali per la successiva industrializzazione in detti territori
dei risultati conseguiti.