Estratto determina V & A n. 2237 del 3 novembre 2014
Autorizzazione della variazione relativamente al medicinale
SAIZEN.
Procedura n.: IT/H/0025/002-004,006-008/II/94G.
E' autorizzata la seguente variazione:
da:
Step 1 Cromatografia su fenil-sefarosio.
L'eluato della cromatografia su Fenil-Sefarosio viene raccolto in
due frazioni (I frazione da 0.03 AU a 0.1 AU e II frazione da 0.1 AU
all'inizio del picco a 0.04 AU alla fine del picco). Le due frazioni
vengono concentrate separatamente e poi vengono riunite.
Segue ultrafiltrazione;
a:
Step 1 Cromatografia su fenil-sefarosio.
L'eluato della cromatografia viene raccolto in in'unica frazione
da 0.1AU a 0.04 AU.
Segue ultrafiltrazione e dialisi;
da:
Step 2: Cromatografia su DEAE-I Sefarosio.
Range di carico della colonna espresso in grammi di proteine:
630 mm: 70-105 g;
1000 mm: 175-263 g.
Il filtro per ultrafiltrazione (UF) #3 e' costituito da
polieteresulfone ed ha un cutoff di peso molecolare di 8 kDa;
a:
Range di carico della colonna espresso in grammi di proteine per
litro di resina.
Step 2 - DEAE-I Sepharose: 1.0-1.5 g/L.
Il filtro per ultrafiltrazione (UF) #3 e' costituito da cellulosa
ed ha una dimensione di cutoff di peso molecolare di 5 kDa;
da:
Step 3 (gel filtrazione).
Due colonne alternative AcA54 o Supersedex 75PG.
Filtrazione prima di caricare su colonna AcA54.
Range di carico della colonna espresso in grammi di proteina:
50-210 g;
a:
Step 3 (gel filtrazione).
Una colonna Supersedex 75PG.
Range di carico della colonna espresso in grammi di proteina per
litro di resina: 0.5-2.1 g/L;
da:
Step 4 - Cromatografia su CM Sefarosio.
Range di carico della colonna espresso in grammi di proteina:
440 mm: 50-125 g;
630 mm: 100-250 g;
a:
Step 4 - Cromatografia su CM Sefarosio.
Range di carico della colonna espresso in grammi di proteina per
litro di resina: 2.8 - 4.1 g/L;
da:
Step 5 - Cromatografia su DEAE-II Sefarosio.
Range di carico della colonna espresso in grammi di proteina:
440 mm: 50-125 g;
630 mm: 100-250 g;
a:
Step 5 - Cromatografia su DEAE-II Sefarosio.
Range di carico della colonna espresso in grammi di proteina per
litro di resina: 2.7-3.9 g/L;
da:
Step 2 (cromatografia su DEAE-I Sefarosio).
IPC:
Contenuto di proteine (carico);
Bioburden (carico);
Conduttivita';
pH;
Purezza (frazione DEAE-I);
a:
Step 2 (cromatografia su DEAE-I Sefarosio).
IPC:
Contenuto di proteine (carico);
Bioburden (carico);
Bioburden sul flusso di equilibrazione;
Conduttivita';
pH;
Purezza (frazione DEAE-I);
da:
Step 3 (cromatografia Superdex 75 PG).
IPC su bulk intermedio:
Dimeri e HMW;
Proteine correlate;
a:
Step 3 (cromatografia Superdex 75 G).
IPC su bulk intermedio:
Dimeri e HMW;
Proteine correlate;
Saggio tramite SE-HPLC;
Bioburden;
a:
In Process Control (IPC) durante il processo di purificazione:
contenuto proteico totale tramite spettrofotometria.
Parametri e preparazione del campione:
soluzione campione in acqua;
lunghezza d'onda: 276 nm;
coefficiente di estinzione = 0.722;
nessuna correzione della torbidita';
a:
In Process Control (IPC) durante il processo di purificazione:
contenuto proteico totale tramite spettrofotometria.
Parametri e preparazione del campione:
soluzione campione in 0.025 M di buffer fosfato;
lunghezza d'onda vicina a 280 nm;
coefficiente di estinzione = 0.82;
correzione della torbidita';
da:
In Process Control (IPC) durante il processo di coltura cellulare
e il processo di purificazione: contenuto proteico totale con metodo
Bradford.
Curva standard nel range 10-200 µg/mL con 5 concentrazioni: 10
µg/mL, 50 µg/mL, 100 µg/mL, 150 µg/mL e 200 µg/mL.
Diluizione indipendente;
a:
In Process Control (IPC) durante il processo di coltura cellulare
e il processo di purificazione: contenuto proteico totale con metodo
Bradford.
Curva standard nel range 12.5-200 µg/mL con 5 concentrazioni:
12.5 µg/mL, 25 µg/mL, 50 µg/mL, 100 µg/mL e 200 µg/mL.
Diluizione seriale;
da:
Step 4 e 5 Modifiche editoriali.
Il testo e' diverso per lo stesso metodo nelle sezioni
purificazione e coltura cellulare del CTD;
a:
Step 4 e 5 Modifiche editoriali.
Allineamento della descrizione del metodo nelle sezioni
purificazione e coltura cellulare del CTD;
da:
Test virali su banche cellulari e su bulk raccolto.
1. Attivita' della transcrittasi inversa;
2. IVVT attraverso 6 linee cellulari rilevatrici:
MRC-5 (umano);
HeLa (umano);
Vero (di scimmia);
MDBK (bovino);
3T6 (murino);
A9 (murino);
a:
Test virali su banche cellulari e su bulk raccolto.
1. Attivita' della transcrittasi inversa;
2. IVVT attraverso 7 linee cellulari rilevatrici:
MRC-5 (umano);
HeLa (umano);
Vero (di scimmia);
CHO (criceto cinese);
MDBK (bovino);
3T6 (murino);
A9 (murino),
relativamente al medicinale Saizen, ed alle confezioni autorizzate
all'immissione in commercio in Italia a seguito di procedura di mutuo
riconoscimento.
Titolare A.I.C.: Merck Serono S.p.A.
Smaltimento scorte
I lotti gia' prodotti possono essere mantenuti in commercio fino
alla data di scadenza del medicinale indicata in etichetta ai sensi
dell'art. 1, comma 5 della Determina AIFA n. 371 del 14 aprile 2014
pubblicata nella Gazzetta Ufficiale n. 101 del 3 maggio 2014.
Decorrenza di efficacia della determinazione: dal giorno
successivo a quello della sua pubblicazione, per estratto, nella
Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana.